ชุดตรวจ Chlamydia Trachomatis (Ct) IgG ELISA
สำหรับใช้ในการวินิจฉัยนอกร่างกายและใช้โดยผู้เชี่ยวชาญเท่านั้น
ชื่อ
ชุดตรวจ Anti-Ct IgG ELISA (ซีรั่ม/พลาสมา)
วัตถุประสงค์การใช้งาน
ชุดตรวจนี้เป็นการตรวจเชิงปริมาณของ Chlamydia trachomatis (Ct) IgG ในซีรั่ม/พลาสมาของมนุษย์ ชุดตรวจนี้เหมาะสำหรับการคัดกรองทางคลินิกและการวินิจฉัยการติดเชื้อ Ct ในซีรั่ม/พลาสมา
หลักการทดสอบ
แอนติเจน Ct ถูกดูดซับบนเฟสของแข็งในไมโครเพลทสำหรับทำปฏิกิริยา หากมีแอนติบอดี Ct IgG ในตัวอย่างทดสอบ จะจับกับแอนติเจน Ct ที่เคลือบในไมโครเพลท เกิดเป็นสารประกอบแอนติเจน-แอนติบอดี จากนั้นจะจับกับเอนไซม์ที่ติดฉลากแอนติ-แอนติบอดี และเกิดเป็นสารประกอบแอนติเจน-แอนติบอดี-แอนติบอดีบนพื้นผิวของไมโครเพลท และแสดงสีฟ้าในหลุมที่เกี่ยวข้องผ่านการทำงานของสารตั้งต้น ดังนั้นจึงสามารถตรวจจับ Ct IgG ในซีรั่ม/พลาสมาของมนุษย์ได้อย่างจำเพาะเจาะจง
ขั้นตอนการทดสอบ
1. ปรับอุณหภูมิของรีเอเจนต์ทั้งหมดให้เป็นอุณหภูมิห้องเป็นเวลา 15 นาทีก่อนใช้งาน
2. เจือจางบัฟเฟอร์ล้างในอัตราส่วน 1:40 ด้วยน้ำกลั่นก่อนใช้งาน
3. เติม Sample Diluent 100 ไมโครลิตร ลงในหลุมที่เกี่ยวข้อง (ห้ามเติมในหลุมว่าง หลุมควบคุมเชิงลบ และหลุมควบคุมเชิงบวก) ตัวอย่างควรสอดคล้องกับจำนวนของไมโครเพลท แต่ละเพลทควรมีหลุมควบคุมเชิงลบ 2 หลุม หลุมควบคุมเชิงบวก 1 หลุม และหลุมควบคุมว่าง 1 หลุม เติมตัวอย่าง 5 ไมโครลิตร ลงในหลุมที่เกี่ยวข้อง ผสมให้เข้ากันดีโดยใช้ปิเปตต์ เติมสารควบคุมเชิงลบและสารควบคุมเชิงบวก 50 ไมโครลิตร ลงในหลุมควบคุมเชิงลบและหลุมควบคุมเชิงบวก (ห้ามเติมในหลุมว่าง)
หมายเหตุ: ใช้ปิเปตต์ทิ้งที่แยกต่างหากสำหรับตัวอย่างแต่ละชนิด สารควบคุมเชิงลบและเชิงบวก เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้าม
4. เขย่าเบาๆ เพื่อผสมเป็นเวลา 30 วินาที บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 20 นาที โดยปิดเพลทด้วยแผ่นปิดเพลท
5. เมื่อสิ้นสุดการบ่ม ให้ลอกและทิ้งฝาครอบเพลท นำออก เติมบัฟเฟอร์ล้างลงในแต่ละหลุมเป็นเวลา 20 วินาที ทำซ้ำ 5 ครั้ง หลังจากการล้างครั้งสุดท้าย ให้คว่ำเพลทลงบนกระดาษซับหรือผ้าสะอาด และเคาะเพื่อกำจัดสิ่งตกค้าง
6. เติม Enzyme Conjugate 50 ไมโครลิตร ตามลำดับ (ห้ามเติมในหลุมว่าง)
7. บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 20 นาที โดยปิดเพลทด้วยแผ่นปิดเพลท ทำซ้ำขั้นตอนการล้าง 5 ครั้ง ตามขั้นตอนที่ 5
8. เติม Substrate A 50 ไมโครลิตร และ Substrate B 50 ไมโครลิตร (ห้ามเติมในหลุมว่าง) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที โดยปิดเพลทด้วยแผ่นปิดเพลท
9. เติม Stop Solution 50 ไมโครลิตร ลงในแต่ละหลุม (ห้ามเติมในหลุมว่าง) ผสมเบาๆ โดยการเขย่า อ่านค่าการดูดกลืนแสงภายใน 10 นาทีหลังจากการหยุดปฏิกิริยา ปรับเทียบเครื่องอ่านเพลทด้วยหลุมว่าง และอ่านค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตร หากใช้เครื่องวัดแบบสองฟิลเตอร์ ให้ตั้งค่าความยาวคลื่นอ้างอิงที่ 630 นาโนเมตร ห้ามใช้หลุมว่างหากใช้ความยาวคลื่นคู่ในการตรวจวัด คำนวณค่า Cut-Off และประเมินผล
การแปลผลการทดสอบ
การวัดเวลา: อ่านค่าความหนาแน่นเชิงแสง (OD) ของตัวอย่างที่ 450 นาโนเมตร ด้วยเครื่องอ่านไมโครเพลท
ค่า OD เฉลี่ยของสารควบคุมเชิงลบ ≤ 0.1 และค่า OD เฉลี่ยของสารควบคุมเชิงบวก ≥ 0.8 การทดสอบจะถูกต้อง มิฉะนั้นการทดสอบจะไม่ถูกต้อง
ค่า Cut-Off (C.O.) = ค่า OD เฉลี่ยของสารควบคุมเชิงลบ x 3 (คำนวณโดย 0.10 เมื่อค่า OD เฉลี่ยของสารควบคุมเชิงลบคือ0.10)
ผลบวก: ค่า OD ของตัวอย่าง ≥ C.O.
ข้อความของคุณจะต้องอยู่ระหว่าง 20-3,000 ตัวอักษร!
Thai
