Elisa LH Test Strip ISO13485 Luteinizing Hormone Test Kit 96 ชิ้น

LH Elisa Kit Luteinizing Hormone

1. วัตถุประสงค์การใช้งาน

การทดสอบภูมิคุ้มกันสำหรับการกำหนดปริมาณฮอร์โมน luteinizing ในหลอดทดลองในซีรัมของมนุษย์

2. สรุป

• LH (ฮอร์โมน luteinizing) ร่วมกับ FSH (ฮอร์โมนกระตุ้นรูขุมขน) อยู่ในตระกูลโกนาโดโทรปินLH และ FSH ควบคุมและกระตุ้นการเจริญเติบโต และการทำงานของอวัยวะสืบพันธุ์ (รังไข่และอัณฑะ) ทำงานร่วมกันเช่น FSH, TSH และ hCG, LH เป็นไกลโคโปรตีนที่ประกอบด้วยสองหน่วยย่อย (α- และ β-chains)(1, 2, 3) โปรตีโอฮอร์โมนนี้ประกอบด้วยกรดอะมิโน 121 ตัวและสายน้ำตาลสามสาย มีน้ำหนักโมเลกุล 29,500 ดาลตันในผู้หญิง gonadotropins ทำหน้าที่ภายในวงจรควบคุมต่อมใต้สมอง - ต่อมใต้สมอง - รังไข่เพื่อควบคุมรอบประจำเดือน
• LH และ FSH ถูกปล่อยออกมาเป็นพัลส์จากเซลล์ gonadotropic ของต่อมใต้สมองส่วนหน้าและผ่านกระแสเลือดไปยังรังไข่ที่นี่ gonadotropins กระตุ้นการเจริญเติบโตและการเจริญเติบโตของรูขุมขนและด้วยเหตุนี้การสังเคราะห์ทางชีวเคมีของเอสโตรเจนและโปรเจสเตอโรนความเข้มข้นของ LH สูงสุดเกิดขึ้นระหว่างช่วงพีคของรอบกลาง และกระตุ้นการตกไข่และการก่อตัวของ corpus luteum ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์การหลั่งหลักของฮอร์โมนคือโปรเจสเตอโรนในเซลล์ Leydig ของอัณฑะ LH ช่วยกระตุ้นการผลิตฮอร์โมนเพศชายการกำหนดความเข้มข้นของ LH ใช้ในการอธิบายความผิดปกติภายในระบบต่อมใต้สมอง-ต่อมใต้สมองการกำหนด LH ร่วมกัน ร่วมกับ FSH ใช้สำหรับบ่งชี้ต่อไปนี้: โรคประจำตัวที่มีโครโมโซมผิดปกติ (เช่น Turner's syndrome), รังไข่ polycystic (PCO), ชี้แจงสาเหตุของประจำเดือน, โรควัยหมดประจำเดือน, และสงสัยว่าเซลล์ Leydig ไม่เพียงพอ(1, 4, 5)

3. หลักการทดสอบ

หลักการแซนวิชระยะเวลาการทดสอบทั้งหมด: 80 นาที

• ตัวอย่าง ไมโครเวลล์เคลือบ Anti-LH และเอนไซม์ที่ติดฉลากว่า Anti-LH ถูกรวมเข้าด้วยกัน

• ในระหว่างการฟักตัว LH ที่มีอยู่ในตัวอย่างจะได้รับอนุญาตให้ทำปฏิกิริยา

พร้อมกันกับแอนติบอดีทั้งสอง ทำให้โมเลกุล LH เป็น

คั่นกลางระหว่างเฟสของแข็งและแอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์

• หลังจากล้างแล้ว สารเชิงซ้อนจะถูกสร้างขึ้นระหว่างเฟสของแข็ง LH ภายในตัวอย่างและแอนติบอดีที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์โดยปฏิกิริยาทางภูมิคุ้มกัน

• จากนั้นเติมสารละลายของพื้นผิวและเร่งปฏิกิริยาด้วยสารเชิงซ้อนนี้ ส่งผลให้เกิดปฏิกิริยาโครโมเจกต์ปฏิกิริยาโครโมโซมที่เกิดขึ้นจะถูกวัดเป็นค่าการดูดกลืนแสง

• การดูดกลืนแสงเป็นสัดส่วนกับปริมาณของ LH ในตัวอย่าง

รีเอเจนต์

วัสดุที่มีให้

• ไมโครเพลทเคลือบ 8 x 12 แถบ 96 หลุม เคลือบด้วยโมโนโคลนอลของเมาส์ล่วงหน้า

ต่อต้าน LH.

• เครื่องสอบเทียบ 6 ขวด ขวดละ 1 มล. พร้อมใช้ความเข้มข้น: 0(A), 5(B), 20(C), 50(D), 100(E) และ 200(F) mIU/มล.

• Enzyme Conjugate, 1 ขวด, 11 มล. ของ HRP (horseradish peroxidase) ที่ติดฉลาก monoclonal Anti-LH ของเมาส์ในบัฟเฟอร์ Tris-NaCl ที่มี BSA (bovine serum albumin)ประกอบด้วยสารกันบูด ProClin300 0.1%

• Substrate, 1 vial, 11ml, พร้อมใช้, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Stop Solution, 1 vial, 6.0 ml of 1 mol/L sulfuric acid.

• Wash Solution Concentrate, 1 ขวด, 25 มล. (เข้มข้น 40X), PBS-Tween

น้ำยาล้าง.

• IFU จำนวน 1 ชุด

• ฝาจาน: 1 ชิ้น.

วัสดุที่จำเป็น (แต่ไม่ได้ให้มา)

• เครื่องอ่านไมโครเพลทพร้อมความสามารถในการดูดซับความยาวคลื่น 450nm และ 620nm

• เครื่องซักผ้าไมโครเพลท

• ตู้ฟัก

4. ขั้นตอนการทดสอบ

• ใช้เฉพาะจำนวนหลุมที่ต้องการและจัดรูปแบบหลุมไมโครเพลทสำหรับ

แต่ละเครื่องสอบเทียบและตัวอย่างที่จะทดสอบ

• เพิ่มเครื่องสอบเทียบหรือตัวอย่าง 25 ไมโครลิตรในแต่ละหลุม

• เติมเอ็นไซม์คอนจูเกต 100 ไมโครลิตรลงไปในแต่ละบ่อ

• เขย่าไมโครเพลทเบาๆ เป็นเวลา 30 วินาทีเพื่อผสม

• ปิดฝาจานและฟักที่อุณหภูมิ 37 °C เป็นเวลา 60 นาที

• ทิ้งเนื้อหาของไมโครเพลทโดยการแยกส่วนหรือความทะเยอทะยานถ้า

เท เคาะ และซับจานให้แห้งด้วยกระดาษดูดซับ

• เติมน้ำยาล้าง 350 ไมโครลิตร เท (ก๊อกและซับ) หรือสำลักทำซ้ำอีก 4 ครั้ง รวมเป็น 5 ครั้งสามารถใช้แหวนรองไมโครเพลทแบบอัตโนมัติได้เมื่อสิ้นสุดการซัก ให้พลิกจานและเคาะน้ำยาล้างที่เหลือลงบนกระดาษซับน้ำ

• เพิ่มสารตั้งต้น 100 ไมโครลิตรในแต่ละหลุม

• ฟักที่อุณหภูมิแวดล้อม (18-25℃) ในที่มืดเพื่อทำปฏิกิริยาเป็นเวลา 20 นาทีอย่าเขย่าจานหลังจากเติมสารย่อย

• เติมสารละลายสต็อป 50 ไมโครลิตรต่อหลุม

• เขย่าประมาณ 15-20 วินาที เพื่อผสมของเหลวภายในบ่อมันสำคัญที่จะ

ตรวจสอบให้แน่ใจว่าสีน้ำเงินเปลี่ยนเป็นสีเหลืองอย่างสมบูรณ์

• อ่านค่าการดูดกลืนแสงของแต่ละหลุมที่ 450 นาโนเมตร (ใช้ 620 ถึง 630 นาโนเมตรเป็น

ความยาวคลื่นอ้างอิงเพื่อลดความไม่สมบูรณ์ของหลุม) ในเครื่องอ่านไมโครเพลต