สําหรับการวินิจฉัยใน vitro และการใช้งานอาชีพเท่านั้น
ชื่อ
ชุดทดสอบ ELISA IgG Anti-Ct (เซรั่ม/พลาสมา)
การใช้
ชุดนี้เป็นการตรวจหาเชื้อ IgG ของ Chlamydia trachomatis (Ct) ในเซรั่ม/พลาสมาของมนุษย์
เหมาะสําหรับการตรวจคลินิกและการวินิจฉัยการติดเชื้อ Ct ในเซรัส / พลาสมา
หลักการทดสอบ
แอนติเจน Ct ถูกซึมซึมในระยะแข็งไปยังไมโครโพลเลตปฏิกิริยาของโพลิสไตเรน
ในตัวอย่างการทดสอบ มันเชื่อมต่อกับแอนติเจน Ct ที่เคลือบด้วยไมโครเพลต สร้างองค์ประกอบแอนติเจน-แอนติบอดี
ติดกับเอนไซม์ที่ติดป้ายว่า แอนติบอดี และสร้างซับซ้อน แอนติเจน แอนติบอดี แอนติบอดีบนผิว
ของ microplate และแสดงสีน้ําเงินในที่ตรงกันอย่างดีผ่านการดําเนินงานของพื้นฐาน
สามารถตรวจพบ Ct IgG ในเซรั่ม/พลาสมาของมนุษย์ได้
ขั้นตอนการทดสอบ
1. ปรับความสมดุลของสารปฏิกิริยาทั้งหมดให้อยู่ในอุณหภูมิห้อง 15 นาที ก่อนการใช้
2. ลดน้ําผสมระบายน้ําในอัตราการลด 1: 40 ด้วยน้ําระบายน้ําก่อนใช้
3. เพิ่ม 100μL ของตัวอย่างประปาในเหมืองที่ตรงกัน (ไม่เพิ่มในเหมืองว่าง
ช่องตรวจสอบและช่องตรวจสอบบวก) ตัวอย่างควรสอดคล้องกับจํานวนของไมโคร
แผ่น, แผ่นแต่ละแผ่นควรมีคอนโทรลลบ 2 ช่อง, คอนโทรลบวก 1 ช่องและว่าง
ตรวจสอบ 1 หลุม เพิ่มตัวอย่าง 5μL ในหลุมที่เกี่ยวข้อง ผสมให้ดีโดยใช้ pipette เพิ่ม
50μL การควบคุมลบและการควบคุมบวก
เพิ่มเข้าไปในบ่อน้ําว่าง)
หมายเหตุ: ใช้ปลาย pipette การกําจัดแยกสําหรับตัวอย่างแต่ละตัว, การควบคุมลบและบวก
หลีกเลี่ยงการติดเชื้อข้าม
4สั่นให้ละเอียดเพื่อผสม 30 นาที อุบที่ 37 °C เป็นเวลา 20 นาที ด้วยผิวแผ่นปิด
ปิดแผ่น
5หลังจบการฝัง ควรรับเปลือยกระดาษออกและโยนทิ้ง
กล่องละ 20 วินาที ย้ํา 5 ครั้ง หลังรอบล้างครั้งสุดท้าย
กระดาษเปียกหรือผ้าเช็ดที่สะอาด และแตะมันเพื่อกําจัดเศษเหลือ
6. ตามลําดับ การเพิ่ม Enzyme Conjugate 50μL (อย่าเพิ่มในหลุมว่าง)
7หมักที่ 37 °C เป็นเวลา 20 นาที โดยใช้เยื่อแผ่นปิดแผ่นปิดแผ่น
ขั้นตอนล้าง 5 ครั้ง เช่นในขั้นตอนที่ 5
8. เพิ่มสับสราต A 50μL และสับสราต B 50μL (ไม่เพิ่มในบานเปล่า)
10 นาทีกับผิวแผ่นปิดปิดแผ่น
9. เพิ่ม 50μL Stop Solution ลงในแต่ละหลุม (อย่าเพิ่มในหลุมว่าง) ผสมให้ละเอียด โดยสั่น
กล่องอ่านแผ่นด้วยเครื่องอ่านแผ่นว่าง
ดีและอ่านการดูดซึมที่ 450nm.
ความยาวคลื่นที่ 630nm การตั้งค่าไม่มีขุมว่างถูกอนุญาตถ้าใช้ความยาวคลื่นสองเพื่อตรวจจับ
ค่าตัดและประเมินผล
การตีความผล
โครโนเมตรี: อ่านความหนาแน่นทางแสง (OD) ของตัวอย่างที่ 450nm ด้วยเครื่องอ่านแผ่นไมโคร
ค่า OD กลางของคอนโทรลลบ ≤ 0.1 และค่า OD กลางของคอนโทรลบวก ≥ 0.8, การทดสอบเป็นจริง
ไม่งั้นการทดสอบจะไม่ถูกต้อง
ค่าตัด (C.O.) = ค่า OD กลางของควบคุมลบ x 3 (คํานวณด้วย 0.10 เมื่อค่าเฉลี่ย
ค่า OD ของคอนtrollลบ < 010, คํานวณจากค่าจริงเมื่อค่าเฉลี่ยของการควบคุมลบ OD
ค่า > 0.10)
ผลบวก: ค่า OD ตัวอย่าง ≥ CO