25-OH วิตามิน D ELISA TEST KIT

การใช้

ชุดตรวจพบวิตามิน D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA) ใช้ในการตรวจปริมาณของวิตามิน D ในเซรัสมนุษย์

สรุปและความสําคัญทางคลินิก

 วิตามินดี เป็นตัวนําของฮอร์โมนละลายในไขมันที่ผลิตโดยหลัก ๆ ผ่านการเผชิญหน้ากับแสงอาทิตย์ของผิวหนัง วิตามินดี เป็นวัตถุชีวภาพที่อ่อนแอและต้องผ่านขั้นตอน hydroxylation เพื่อที่จะกลายเป็นกิจกรรมร่างกายเราสามารถสังเคราะห์วิตามินดี 3 ได้วิตามินดี 2 สามารถรับได้จากอาหารเสริมหรืออาหารเสริมวิตามิน D3 และ D2 ติดกับโปรตีนผูกวิตามิน D (VDBP) ในพลาสมาและถูกขนส่งไปยังตับเพื่อกลายเป็น 25-ฮิดรอ็กซิวิตามิน D (25-OH วิตามิน D)เนื่องจากวิตามิน D 25-OH เป็นรูปแบบที่เก็บรักษาหลัก, มัดสัดส่วนของวิตามิน D ในเลือดสามารถนําไปประเมินภาวะวิตามิน D ทั้งหมด.มากกว่า 95% ของวิตามิน D 25-OH ที่สามารถวัดได้ในเซรั่มคือวิตามิน D 25-OH,ขณะที่วิตามิน D2 ขนาด 25-OH เพียงจะบรรลุระดับที่วัดได้ในผู้ป่วยที่รับประทานอาหารเสริมวิตามิน D2 วิตามิน D เป็นสิ่งจําเป็นสําหรับสุขภาพกระดูก ในเด็ก ความขาดแคลนที่รุนแรงอาจนําไปสู่โรคสะเก็ดเงินในผู้สูงอายุนอกจากนี้ สัดส่วนวิตามิน D 25-OH ที่ต่ําก็เกี่ยวข้องกับความหนาแน่นของกระดูกที่ต่ําวิตามินดีที่ไม่เพียงพอยังถูกเชื่อมโยงกับโรคเบาหวานวิตามิน D2 และวิตามิน D3 ที่อยู่ในตลาดในปัจจุบันยอดปริมาณของวิตามิน D2 25-OH และวิตามิน D3 25-OH ในเซรัสหรือพลาสมา." ในสถานการณ์ทางการแพทย์ การติดตามระดับวิตามินดีทั้งหมด 25-OH อย่างแม่นยําเป็นสิ่งสําคัญ Vitamin D-deficient patients who take daily vitamin D supplements should have their serum or plasma vitamin D levels monitored regularly to achieve optimal levels and prevent their 25-OH vitamin D concentrations from reaching levels that are considered toxicการวัดวิตามิน D ทั้งหมดใช้แอนติบอดีเฉพาะเพื่อจับ 25-ไฮดรอ็กซี่วิตามิน D3 และ D2การทดสอบนี้ถูกออกแบบมาเพื่อวัดปริมาณของวิตามิน D รวม 25-OH ในเซรั่มและพลาสมาของมนุษย์ เพื่อช่วยในการประเมินวิตามินD ความเพียงพอ

หลักการ

ชุดทดสอบปริมาณของวิตามิน D 25-OH เป็นที่พัฒนาขึ้นจากการทดสอบแบบยึดยึดยึดที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ในระยะแข็งระบบการวัดใช้แอนติบอดีหนึ่งสําหรับระยะแข็ง (ไมโครทิตเตอร์หลุม) immobilization และอีกแอนติบอดี monoklonal ในสารละลาย. แอนติบอดีที่สามที่จําได้ แอนติบอดีที่สองที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (เพรอกซิเดซหอม)มาตรฐานและตัวอย่างการทดสอบ (เซรั่ม) จะเพิ่มเข้าไปใน 25 OH วิตามิน D ผิวเคลือบแอนติบอดี microtiter ถัง, อุปสรรค 30 นาทีพร้อมกับแอนติบอดีที่สอง หลังจากล้าง, แอนติบอดีที่สามติดป้ายด้วยเพอร์ออกซิเดสขิง (คอนจูเกท) ถูกเพิ่มขึ้น หากมนุษย์ 25-OH วิตามิน D มีอยู่ในตัวอย่าง,มันจะผสมผสานกับตัวต่อต้านในหลุม และตัวต่อต้าน enzyme สร้างแซนวิชระหว่างระยะแข็งและตัวต่อต้าน enzymeถ้ําถูกล้างด้วยน้ําเพื่อกําจัดแอนติบอดีที่ติดป้าย. การเพิ่มสารละลายของ TMB และอุปกรณ์ปลูกเป็นเวลา 20 นาที ส่งผลให้เกิดสีฟ้า การพัฒนาสีหยุดด้วยการเพิ่มสารละลาย Stopสีเปลี่ยนเป็นสีเหลืองและวัดด้วยสายสีฉายที่ 450 nmคอนเซนเทรชันของวิตามินดี สัดส่วนตรงกับความเข้มข้นของสีของตัวอย่างทดสอบ

การเตรียม

1ให้ตัวอย่างและสารปฏิกิริยาทั้งหมดบรรลุอุณหภูมิห้อง (~ 25 °C) และผสมให้ดี โดยการหมุนกลับอ่อนโยนก่อนการใช้

2.เตรียม Wash Buffer โดยการละลาย Wash Concentrate 20 เท่าด้วยน้ําลดไอโอเนียส สารละลายล้างที่ละลายได้คงที่ในอุณหภูมิห้องอย่างน้อยหนึ่งสัปดาห์

ข้อควรระวังสําหรับผู้ใช้

1การจัดการควรห้ามการใส่ pipette ผ่านปาก ใช้แค่ pipette ที่มีปลายทิ้งสําหรับตัวอย่างแต่ละตัว

2อย่าผสมวัสดุจากชุดหลักที่แตกต่างกัน อย่าใช้ส่วนประกอบของชุดเกินวันหมดอายุ

3วัสดุทั้งหมดควรนําไปสู่อุณหภูมิห้อง ก่อนการใช้