25-OH วิตามิน D ELISA TEST KIT

การใช้

ชุดตรวจพบวิตามิน D 25-OH (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA) ใช้ในการตรวจปริมาณของวิตามิน D ในเซรัสมนุษย์

สรุปและความสําคัญทางคลินิก

วิตามินดี เป็นตัวนําของฮอร์โมนละลายในไขมันที่ผลิตโดยหลัก ๆ ในผิวหนังโดยการเผชิญกับแสงอาทิตย์ วิตามินดีเป็นวัตถุชีวภาพที่อ่อนแอและต้องผ่านขั้นตอน hydroxylation เพื่อที่จะกลายเป็นกิจกรรมร่างกายเราสามารถสังเคราะห์วิตามินดี 3 ได้วิตามิน D2 ได้รับการรับประทานด้วยอาหารที่เสริมทรัพยากร หรือนํามาทานด้วยอาหารเสริมวิตามิน D3 และ D2 ติดต่อกับโปรตีนผูกวิตามิน D (VDBP) ในหลอดเลือดดําและนําไปสู่ตับเพื่อกลายเป็นวิตามิน D 25-ฮิดรอ็กซี่ (25-OH วิตามิน D)เนื่องจากวิตามิน D 25-OH เป็นรูปแบบที่เก็บรักษาหลัก คลังของวิตามิน D ในเลือดจะถูกใช้ในการประเมินสถานะวิตามิน D ทั่วไปเป็นวิตามิน D3 25-OH ในขณะที่วิตามิน D2 25-OH จะมีระดับที่วัดได้เพียงในผู้ป่วยที่รับประทานอาหารเสริมวิตามิน. วิตามินดี เป็นสิ่งจําเป็นสําหรับสุขภาพกระดูก ในเด็ก ความขาดแคลนที่รุนแรงนําไปสู่โรคสะเก็ดเงิน ในผู้สูงอายุ ความเสี่ยงของการตกได้ถูกอ้างอิงจากความขาดแคลนของวิตามินดี เนื่องจากความอ่อนแอของกล้ามเนื้อ,วิตามิน D 25-OH ที่มีปริมาณต่ํา จะทําให้กระดูกมีปริมาณแร่ธาตุต่ํากว่า และการขาดปริมาณเช่นกัน จะทําให้เกิดโรคเบาหวาน มะเร็ง โรคหัวใจและหลอดเลือด และโรคภูมิคุ้มกันอาหารเสริมวิตามิน D ทั้งสองที่มีอยู่ในตลาด (วิตามิน D2 และวิตามิน D3) ถูกแปลงเป็นวิตามิน D 25-OH ในตับ.ยอดปริมาณของวิตามิน D2 25-OH และวิตามิน D3 25-OH ในเซรัสหรือพลาสมาการติดตามที่แม่นยําของปริมาณวิตามินดีทั้งหมด 25-OH เป็นสิ่งสําคัญในสถานการณ์ทางคลินิก. Vitamin D deficient patients who are prescribed a daily Vitamin D supplement should regularly monitor their serum or plasma Vitamin D levels in order to reach an optimal level and prevent their 25-OH Vitamin D concentrations from reaching excessive levels that are considered toxicการตรวจวิดามิน D ทั้งหมดใช้แอนติบอดีพิเศษในการจับทั้ง 25-ไฮดรอ็กซี่วิตามิน D3 และ D2การวัดนี้มีมุ่งหมายเพื่อการกําหนดปริมาณของวิตามิน D รวม 25-OH ในเซรั่มและพลาสมาของมนุษย์เป็นตัวช่วยในการประเมินความเพียงพอของวิตามินดี

หลักการ

ชุดทดสอบปริมาณของวิตามิน D 25-OH เป็นที่พัฒนาขึ้นจากการทดสอบแบบยึดยึดยึดที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ในระยะแข็งระบบการวัดใช้แอนติบอดีหนึ่งสําหรับระยะแข็ง (ไมโครทิตเตอร์หลุม) immobilization และอีกแอนติบอดี monoklonal ในสารละลาย. แอนติบอดีที่สามที่จําได้ แอนติบอดีที่สองที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (เพรอกซิเดซหอม)มาตรฐานและตัวอย่างการทดสอบ (เซรั่ม) จะเพิ่มเข้าไปใน 25 OH วิตามิน D ผิวเคลือบแอนติบอดี microtiter ถัง, อุปสรรค 30 นาทีพร้อมกับแอนติบอดีที่สอง หลังจากล้าง, แอนติบอดีที่สามติดป้ายด้วยเพอร์ออกซิเดสขิง (คอนจูเกท) ถูกเพิ่มขึ้น หากมนุษย์ 25-OH วิตามิน D มีอยู่ในตัวอย่าง,มันจะผสมผสานกับตัวต่อต้านในหลุม และตัวต่อต้าน enzyme สร้างแซนวิชระหว่างระยะแข็งและตัวต่อต้าน enzymeถ้ําถูกล้างด้วยน้ําเพื่อกําจัดแอนติบอดีที่ติดป้าย. การเพิ่มสารละลายของ TMB และอุปกรณ์ปลูกเป็นเวลา 20 นาที ส่งผลให้เกิดสีฟ้า การพัฒนาสีหยุดด้วยการเพิ่มสารละลาย Stopสีเปลี่ยนเป็นสีเหลืองและวัดด้วยสายสีฉายที่ 450 nmคอนเซนเทรชันของวิตามินดี สัดส่วนตรงกับความเข้มข้นของสีของตัวอย่างทดสอบ

สารปฏิกิริยาที่นํามา

ไมโครเพลตเคลือบ: 1 แผ่น (8 × 12 ถัง) พร้อมใช้ โมโนคลอน แอนติ- 25- OH วิตามิน D แอนติบอดีเคลือบจาน microtiter และปิดในถุงอลูมิเนียมถอนแผ่นในถุงปิดใหม่ด้วยยาแห้งเพื่อป้องกันจากความชื้นหลังจากเปิด.เก็บไว้ที่ 2 ~ 8°C จนถึงวันหมดอายุ

HRP คอนจูเกท:1 ถังยา 22 ml พร้อมใช้ เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ~ 8 °C จนถึงวันหมดอายุ

คาลิบราเตอร์:6 ถังยาละ 0. 2 ml มีเครื่องหมาย S0 ถึง S5 และปริมาณ PRL คือ 0, 10, 20, 50,100เก็บไว้ที่ 2 ~ 8 °C จนถึงวันหมดอายุ

การควบคุม:2 ถังยาละ 0. 2 ml

วิตามินดี น้ํายาละลายตัวอย่าง:1 ถังยา 22 มิลลิลิตร พร้อมใช้ เก็บไว้ที่ 2 ~ 8 °C จนถึงวันหมดอายุ

TMB Substrate:1 ถังยา 12 ml พร้อมใช้ เก็บไว้ที่ 2 ~ 8 °C จนถึงวันหมดอายุ

หยุดการแก้ไข:1 ถังยา 12 ml พร้อมใช้ เก็บไว้ที่ 2 ~ 8 °C จนถึงวันหมดอายุ

พัสดุระบายน้ํา:1 ถังยา 15 ml เตรียม 50 ครั้ง ลดน้ําล้างก่อนการทดสอบ เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 2 ~ 8 °C จนถึงวันหมดอายุ

เครื่องปิดแผ่น:2 ชิ้น

กระเป๋าพลาสติกปิดได้ใหม่:1 ชุด

คู่มือการใช้งาน:1 ฉบับ

การเตรียม

1ให้ตัวอย่างและสารปฏิกิริยาทั้งหมดบรรลุอุณหภูมิห้อง (~ 25 °C) และผสมให้ดี โดยการหมุนกลับอย่างอ่อนโยนก่อนการใช้

2.เตรียม Wash Buffer โดยการละลาย Wash Concentrate 20 เท่าด้วยน้ําลดไอโอเนียส์ สารละลายล้างที่ละลายได้คงที่ในอุณหภูมิห้องอย่างน้อยหนึ่งสัปดาห์

ข้อควรระวังสําหรับผู้ใช้

1การจัดการควรห้ามการใส่ pipette ผ่านปาก ใช้ pipette เพียงที่มีปลายการใช้ครั้งเดียวสําหรับตัวอย่างแต่ละตัว

2อย่าผสมวัสดุจากชุดหลักที่แตกต่างกัน อย่าใช้ส่วนประกอบของชุดเกินวันหมดอายุ

3วัสดุทั้งหมดควรนําไปสู่อุณหภูมิห้อง ก่อนการใช้