ชุดทดสอบ ELISA แอนติบอดี (IgE)

การใช้

  ชุดนี้เป็นการตรวจหาปริมาณของสารต้านทาน IgE ทั้งหมด (IgE) ในเซรั่ม / พลาสมาของมนุษย์ใน vitro ผลนี้สามารถช่วยในการวินิจฉัยโรคภูมิแพ้ประเภท Iการทดสอบ IgE ทั้งหมดอาจแนะนําสําหรับผู้ป่วยที่มีการสงสัยว่าเป็นโรคปรสิต.

หลักการ ของ การ ทดสอบ

  อาการแพ้เรื้อรังทันที (อาการแพ้ประเภท I) เกิดจาก IgE ที่เฉพาะเจาะจง สมาธิ IgE ในเซรัสปกติสูงสุดระหว่างอายุ 6 ถึง 15 ปี ในกรณีส่วนใหญ่การเพิ่ม IgE สิปิคในผู้ป่วยในกรณีนี้, ไทเตอร์สามารถเพิ่มขึ้นถึง 1,000 ครั้ง. โดยทั่วไป, หน่วยสากลต่อมิลลิตร (IU / mL) ได้รับการกําหนดว่า: 1 IU / mL เท่ากับ 2.4ng IgE. ในผู้ป่วยที่มีโรคผิวหนังภูมิแพ้ทางหลวง,ระดับ IgE อาจสูงถึง 50นอกจากนี้ ไทเตอร์ IgE ยังสูงขึ้นในผู้ป่วยที่มีโรคปรสิต ผลการทดสอบที่สูงกว่าปกติ ควรพิจารณาผลกระทบของโรคภูมิคุ้มกันของร่างกายที่ยืนยัน

สารปฏิกิริยาไม่ได้ถูกแนะนําสําหรับการตรวจร่างกายของคนแข็งแรง ผลการทดสอบบวกหรือลบเพียงแทนผลการทดสอบ IgE แอนติบอดที่ตรงกันบวกหรือลบความไม่แน่นอนความสัมพันธ์กับผู้ป่วยเป็นโรคและอาจไม่ได้เป็นดัชนีเดียวของการประเมินผู้ป่วย, ต้องควบคู่กับการแสดงภาพทางคลินิกของผู้ป่วย และการตรวจสอบห้องปฏิบัติการอื่น ๆ เพื่อการวิเคราะห์โรคแบบบูรณาการ

วิธีการตรวจสอบของชุดนี้คือการตรวจสอบภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ในสารปฏิกิริยานี้ ได้นําหลักการตรวจสอบภูมิคุ้มกันแบบแอนติบอดีซันติชสองตัวมาใช้แอนติบอดีโมโนคลอนที่จํารู้แอนติ-IgE ถูกเคลือบก่อนในหลุมของไมโครปลาต, และตัวอย่างเซรั่ม / พลาสมาของมนุษย์และแอนติบอดีโมโนคลอนอีกตัวหนึ่งที่ติดป้ายด้วยเอ็นไซม์ค่า OD ถูกอ่านและเนื้อหาของมันถูกคํานวณโดยเครื่องอ่านไมโครปลาท.

ขั้นตอนการทดสอบ

1.สารปฏิกิริยาทั้งหมดควรปล่อยให้ถึงอุณหภูมิห้อง 15 นาทีก่อนการใช้

2. ลดน้ําผงล้างในอัตราการลด 1: 40 ด้วยน้ําระบายก่อนการใช้

3ตัวอย่างควรสอดคล้องกับจํานวนของแผ่นไมโคร แต่ละแผ่นควรมีเหมืองอ้างอิง (จํานวนของเหมืองถูกกําหนดโดยอ้างอิงและตัวอย่างที่จะได้รับการทดสอบ)

หมายเหตุ: ใช้ปลาย pipette การกําจัดแยกกันสําหรับตัวอย่างแต่ละตัวอย่าง, แต่ละอ้างอิงเพื่อหลีกเลี่ยงการติดเชื้อข้าม.

4.เพิ่ม 100μL ของสารระบายตัวอย่างในบ่อที่ตรงกัน, เพิ่ม 20μL ของตัวอย่าง S0, S1, S2, S3, S4, S5 และตัวอย่างแต่ละตัวอย่างในบ่อที่ตรงกัน

5สั่นให้อ่อนเพลียเพื่อให้ผสม อุจจาระที่ 37 °C เป็นเวลา 30 นาที โดยมีผิวแผ่นปิดปิดแผ่น

6. เมื่อสิ้นสุดการหมัก, ถอนและกําจัดฝาจาน. ถอนออก, เพิ่มน้ําสะอาดในแต่ละบ่อ 10 วินาที. ย้ํา 5 ครั้ง. หลังจากรอบการล้างสุดท้าย,เปลี่ยนแผ่นไปบนกระดาษสับ หรือผ้าเช็ดที่สะอาด, และแตะมันเพื่อกําจัดส่วนที่เหลือ

7.ต่อเนื่องด้วยการเพิ่ม Conjugate 100μL. อุบที่ 37°C เป็นเวลา 30 นาที โดยมีเยื่อแผ่นปิดปิดแผ่น

8ล้างจานเป็นขั้นตอนที่ 6

9. เพิ่มสับสราท A (50μL) และสับสราท B (50μL) สั่นให้อ่อนเพลียเพื่อผสม อุปกรณ์ที่ 37 °C เป็นเวลา 10 นาที โดยมีผิวแผ่นปิดปิดแผ่น

10. เพิ่ม 50μL สต็อปโซลูชั่นในแต่ละหลุม ผสมให้ละเอียดด้วยการสั่น, อ่านการดูดซึมภายใน 10 นาทีหลังจากหยุดปฏิกิริยาจากนั้นอ่านค่าการดูดซึมที่ 450nm/ 630nm ด้วยเครื่องอ่านไมโครพลาตคํานวณปริมาณและประเมินผล