ชุดทดสอบ FT3 Elisa 110 นาทีฟรี Triiodothyronine T3 ฟรีตรวจเลือด

FT3
ชุดทดสอบ FT3 ELISA

ฟรี Triiodothyronine 96 การทดสอบ

1. วัตถุประสงค์การใช้งาน
การทดสอบภูมิคุ้มกันสำหรับการกำหนดปริมาณไตรไอโอโดไทโรนีนอิสระในซีรัมของมนุษย์ในหลอดทดลอง

2. สรุป

• Triiodothyronine เป็นหนึ่งในฮอร์โมนไทรอยด์ที่มีอยู่ในซีรัมซึ่งควบคุมการเผาผลาญการกำหนดความเข้มข้นของฮอร์โมนนี้มีความสำคัญต่อการวินิจฉัยความแตกต่างของภาวะยูไทรอยด์ ไฮเปอร์ไทรอยด์ และภาวะไทรอยด์ทำงานต่ำส่วนสำคัญของไตรไอโอโดไทโรนีนทั้งหมดจับกับโปรตีนขนส่ง (TBG, พรีอัลบูมิน, อัลบูมิน)
• ฟรี triiodothyronine (fT3) เป็นรูปแบบที่ทำงานทางสรีรวิทยาของไทรอยด์ฮอร์โมน triiodothyronine (T3)
• การหาค่า T3 อิสระมีข้อดีคือไม่ขึ้นกับการเปลี่ยนแปลงของความเข้มข้นและคุณสมบัติการจับของโปรตีนที่จับการกำหนดพารามิเตอร์การผูกมัดเพิ่มเติม (T-uptake, TBG) จึงไม่มีความจำเป็นในการทำงานของต่อมไทรอยด์ตามปกติ เมื่อความเข้มข้นของโปรตีนพาหะเปลี่ยนแปลงไป ระดับ T3 ทั้งหมดจะเปลี่ยนไปเพื่อให้ความเข้มข้นของ FT3 คงที่
• ดังนั้น การวัดความเข้มข้นของ FT3 จึงสัมพันธ์กับสถานะทางคลินิกได้อย่างน่าเชื่อถือมากกว่าระดับ T3 ทั้งหมด
• หรือตัวอย่างเช่น การเพิ่มขึ้นของระดับ T3 ทั้งหมดที่เกี่ยวข้องกับการตั้งครรภ์ ยาคุมกำเนิด และการรักษาด้วยฮอร์โมนเอสโตรเจนส่งผลให้ระดับ T3 รวมสูงขึ้นในขณะที่ความเข้มข้นของ FT3 ยังคงไม่เปลี่ยนแปลงโดยพื้นฐานนอกจากนี้ ยังพบว่าค่า FT3 เฉลี่ยมีการไล่ระดับจากเด็กเป็นผู้สูงอายุ
• รีเอเจนต์

3. วัสดุที่มีให้
• ไมโครเพลทเคลือบ 8 x 12 แถบ 96 หลุม เคลือบล่วงหน้าด้วยอนุพันธ์ T3
• เครื่องสอบเทียบ 6 ขวด ขวดละ 1 มล. พร้อมใช้ความเข้มข้น: 0(A), 2(B), 5(C), 10(D), 20(E) และ 50(F) pmol/L.
• Enzyme Conjugate, 1 ขวด, 6.0 ml ของ HRP (horseradish peroxidase) ที่ติดฉลากว่า monoclonal Anti-T3 แกะในบัฟเฟอร์ Tris-NaCl ที่มี BSA (bovine serum albumin)ประกอบด้วยสารกันบูด ProClin300 0.2%
• Substrate, 1 vial, 11ml, พร้อมใช้, (tetramethylbenzidine) TMB.
• Stop Solution, 1 vial, 6.0 ml of 1 mol/l sulfuric acid.
• Wash Solution Concentrate, 1 ขวด, 25 ml (เข้มข้น 40X), PBS-Tween wash solution.
• IFU จำนวน 1 ชุด
• ฝาจาน: 1 ชิ้น.

วัสดุที่จำเป็น (แต่ไม่ได้ให้มา)
• เครื่องอ่านไมโครเพลทพร้อมความสามารถในการดูดซับความยาวคลื่น 450nm และ 620nm
• เครื่องซักผ้าไมโครเพลท
• ตู้ฟัก.
• เครื่องปั่นจาน.
• Micropipettes และ micropipettes หลายช่องให้50μlที่มีความแม่นยำดีกว่า 1.5%
• กระดาษดูดซับ
• น้ำกลั่น.

4. ทดสอบผลิตผล

ตรวจสอบให้แน่ใจว่าตัวอย่างของผู้ป่วย เครื่องสอบเทียบ และตัวควบคุมอยู่ที่อุณหภูมิแวดล้อม (18-25 ℃) ก่อนการวัดผสมรีเอเจนต์ทั้งหมดโดยการพลิกกลับเบาๆ ก่อนใช้งาน

• ใช้เฉพาะจำนวนหลุมที่ต้องการและจัดรูปแบบหลุมของไมโครเพลทสำหรับเครื่องสอบเทียบและตัวอย่างแต่ละตัวที่จะวิเคราะห์• เพิ่ม 50 µL ของเครื่องสอบเทียบหรือตัวอย่างในแต่ละหลุม

• เพิ่ม 50 µL ของคอนจูเกตของเอนไซม์ในแต่ละหลุม

• เขย่าไมโครเพลทเบาๆ เป็นเวลา 30 วินาทีเพื่อผสม

• ปิดฝาจานและฟักที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที

• ทิ้งเนื้อหาของไมโครเพลทโดยการแยกส่วนหรือความทะเยอทะยานหากกำลังเท ให้แตะและเช็ดจานให้แห้งด้วยกระดาษซับน้ำ

• เติมน้ำยาล้าง 350 ไมโครลิตร เท (ก๊อกและซับ) หรือสำลักทำซ้ำอีก 4 ครั้ง รวมเป็น 5 ครั้งสามารถใช้แหวนรองไมโครเพลทแบบอัตโนมัติได้เมื่อสิ้นสุดการซัก ให้พลิกจานและเคาะน้ำยาล้างที่เหลือลงบนกระดาษซับน้ำ• เพิ่มสารตั้งต้น 100 ไมโครลิตรในแต่ละหลุม

• ปิดฝาและฟักที่อุณหภูมิแวดล้อม (18-25℃) ในความมืดเพื่อทำปฏิกิริยาเป็นเวลา 20 นาทีอย่าเขย่าจานหลังจากเติมสารย่อย• เติมสารละลายสต็อป 50 ไมโครลิตรต่อหลุม

• เขย่าประมาณ 15-20 วินาที เพื่อผสมของเหลวภายในบ่อสิ่งสำคัญคือต้องตรวจสอบให้แน่ใจว่าสีน้ำเงินเปลี่ยนเป็นสีเหลืองอย่างสมบูรณ์• อ่านค่าการดูดกลืนแสงของแต่ละหลุมที่ 450 นาโนเมตร (โดยใช้ความยาวคลื่นอ้างอิง 620 ถึง 630 นาโนเมตรเพื่อลดความไม่สมบูรณ์ของหลุม) ในเครื่องอ่านไมโครเพลท ควรอ่านผลลัพธ์ภายใน 30 นาทีหลังจากเติมสารละลายสต็อป