HEV Human Igg Elisa Kit Diagnostic สำหรับ IgG Antibody To Hepatitis E Virus

HEV IgG Elisa Kit คุณภาพสูงของมนุษย์ 96Test/Kit

ชุดตรวจวินิจฉัยสำหรับ IgG Antibody to Hepatitis E Virus (ELISA)
แค็ตตาล็อกหมายเลข: BE401A

1. หลักการ

ชุดนี้ใช้วิธี ELISA ทางอ้อมแบบโซลิดเฟสสำหรับการตรวจหาแอนติบอดี IgG ต่อ HEV (ต้าน HEV) ในซีรัมหรือพลาสม่าด้วยขั้นตอนการฟักไข่แบบสองขั้นตอนไมโครเวลล์โพลีสไตรีนถูกเคลือบล่วงหน้าด้วยแอนติเจน HEV รีคอมบิแนนท์ที่ถูกกระตุ้นที่ทำให้บริสุทธิ์แล้วโมโนโคลนัลแอนติบอดีต่อต้าน IgG ของมนุษย์ (สาย r) ของเมาส์ที่คอนจูเกต HRP ทำหน้าที่เป็นตัวติดตามTMB เป็นสารตั้งต้นสำหรับ HRPปฏิกิริยาของเอนไซม์กับสารตั้งต้น TMB ทำให้เกิดการเปลี่ยนสี และความเข้มของการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรบ่งชี้ว่ามีหรือไม่มี IgM แอนติบอดีต้าน HEV ในตัวอย่างการทดสอบมีความเฉพาะเจาะจง มีความละเอียดอ่อน ทำซ้ำได้ และใช้งานง่ายเป็นการตรวจเลือดของการติดเชื้อ HEV

2. วัสดุที่จัดเตรียมให้

1. แผ่นไมโครเวลล์เคลือบแอนติเจน 1 บล็อก (96 หลุม)
2. Specimen Diluent 1 ขวด (12มล.)
3. คอนโทรลคอนโทรล 1 ขวด (1ml)
4. การควบคุมเชิงบวก 1 ขวด (1ml)
5.20 X Wash Buffer (เจือจางก่อนใช้) 1 ขวด (30ml)
6.เอ็นไซม์คอนจูกันต์ (anti human IgG -HRP) 1 ขวด (12ml)
7. ซับสเตรท เอ 1 ขวด (6มล.)
8. สารตั้งต้น B 1 ขวด (6ml)
9. สต็อป โซลูชั่น(2M H2SO4) 1 ขวด (6มล.)
10. ถุงพลาสติก 1 ถุง
11. กระดาษซีล 3 ชิ้น
12. คู่มือ 1 อัน

กระบวนการทดสอบ

1. นำ ELISA Kit for Antibody IgG ไปใช้กับไวรัสตับอักเสบอี (น้ำยาทั้งหมด) และตัวอย่างไปที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน (ประมาณ 30 นาที)

2. น้ำยาล้างบัฟเฟอร์เข้มข้น 1:19 เจือจางด้วย ddH2O

3. สำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง ให้ตั้งค่าตัวควบคุมว่างหนึ่งรายการ ตัวควบคุมค่าบวกสองค่าและค่าลบสามค่าเพิ่มเซรั่มควบคุมบวกและลบ100μlลงในหลุมควบคุมบวกและลบตามลำดับ

4. เติมสารเจือจางตัวอย่าง 100 ไมโครลิตรในหลุมทดสอบแต่ละหลุม จากนั้นใส่เซรั่มทดสอบ 10 ไมโครลิตรลงในหลุมทดสอบปิเปตขึ้นลงเพื่อผสมตัวอย่างให้เข้ากัน

5. ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล แล้วบ่ม 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C

6. ทิ้งของเหลวในหลุมทั้งหมดแล้วเติมบ่อน้ำด้วยน้ำยาล้างพักไว้ 15 วินาที ทิ้งของเหลวในบ่อทั้งหมด และเติมสารละลายล้างลงในบ่อทำซ้ำ 5 ครั้ง และเช็ดให้แห้งหลังจากล้างครั้งสุดท้าย

7. เติม Enzyme Conjugant 100 μl ในแต่ละหลุม ยกเว้นช่องว่าง

8. ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล แล้วบ่ม 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C

9. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 6

10. เพิ่มซับสเตรต A และ B 50μl ตามลำดับในแต่ละหลุม รวมทั้งหลุมว่างด้วยผสมเบา ๆ ป้องกันไม่ให้ถูกแสงและบ่ม 15 นาทีที่ 37°C

11. เติมสารละลายสต็อป 50 ไมโครลิตรลงในแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยา รวมทั้งหลุมที่ว่างเปล่า

12. วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรเทียบกับค่าว่าง หรือวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตร/630-690 นาโนเมตร