HAV IgG Elisa Kit ชุดตรวจวินิจฉัยแอนติบอดีสำหรับไวรัสตับอักเสบเอ

ชุดตรวจวินิจฉัย IgG Antibody to Hepatitis A Virus (ELISA)
แค็ตตาล็อกหมายเลข: BE302A

1. หลักการ

ชุดนี้ใช้วิธี ELISA ทางอ้อมแบบโซลิดเฟสสำหรับการตรวจหาแอนติบอดี IgG กับ HAV (แอนตี้-HAV) ในซีรัมหรือพลาสม่าด้วยขั้นตอนการฟักไข่แบบสองขั้นตอนบ่อน้ำขนาดเล็กโพลีสไตรีนเคลือบล่วงหน้าด้วยแอนติเจน HAV ธรรมชาติบริสุทธิ์โมโนโคลนัลแอนติบอดีต่อต้าน IgG ของมนุษย์ (สาย r) ของเมาส์ที่คอนจูเกต HRP ทำหน้าที่เป็นตัวติดตามTMB เป็นสารตั้งต้นสำหรับ HRPปฏิกิริยาของเอนไซม์กับสารตั้งต้น TMB ทำให้เกิดการเปลี่ยนสี และความเข้มของการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรบ่งชี้ว่ามีหรือไม่มี IgG แอนติบอดีต้าน HAV ในตัวอย่างการทดสอบมีความเฉพาะเจาะจง มีความละเอียดอ่อน ทำซ้ำได้ และใช้งานง่ายใช้สำหรับตรวจเลือดของการติดเชื้อ HAV

2. วัสดุที่จัดเตรียมให้

1. แผ่นไมโครเวลล์เคลือบแอนติเจน 1 บล็อก (96 ช่อง)
2.Negative Control 1 ขวด (1ml)
3.Positive Control 1 ขวด (1ml)
4.20 X Wash Buffer (เจือจางก่อนใช้) 1 ขวด (30ml)
5.เอ็นไซม์คอนจูกัน (anti human IgG -HRP) 1 ขวด (12ml)
6.ซับสเตรท เอ 1 ขวด (6มล.)
7.ซับสเตรทบี 1 ขวด (6มล.)
8.สต็อป โซลูชั่น(2M H2SO4) 1 ขวด (6มล.)
9.ถุงพลาสติก 1 ถุง
10.กระดาษซีล 3 ชิ้น
11.Manual 1 อัน

3. ขั้นตอนการทดสอบ

1. นำ ELISA Kit for Antibody IgG ไปใช้กับไวรัสตับอักเสบเอ (น้ำยาทั้งหมด) และตัวอย่างไปที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน (ประมาณ 30 นาที)

2. สำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง ให้ตั้งค่าตัวควบคุมว่างหนึ่งรายการ ตัวควบคุมค่าบวกสองค่า และค่าลบสามค่าเพิ่มเซรั่มควบคุมบวกและลบ100μlลงในหลุมควบคุมบวกและลบตามลำดับ

3. เพิ่มเซรั่ม 50μl ในแต่ละหลุมทดสอบ ปิเปตขึ้นและลงเพื่อผสมตัวอย่างให้เข้ากัน

4. ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล แล้วบ่ม 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C

5. ทิ้งของเหลวในหลุมทั้งหมดแล้วเติมบ่อน้ำด้วยน้ำยาล้างพักไว้ 15 วินาที ทิ้งของเหลวในบ่อทั้งหมด และเติมสารละลายล้างลงในบ่อทำซ้ำ 5 ครั้ง และเช็ดให้แห้งหลังจากล้างครั้งสุดท้าย

6. เพิ่ม 100 μl Enzyme Conjugant ในแต่ละหลุม ยกเว้นช่องว่าง

7. ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล แล้วบ่ม 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C

8. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 6

9. เพิ่มสารตั้งต้น A และ B 50μl ตามลำดับในแต่ละหลุมรวมทั้งหลุมว่างผสมเบา ๆ ป้องกันไม่ให้ถูกแสงและบ่ม 15 นาทีที่ 37°C

10. เติมสารละลายสต็อป 50 ไมโครลิตรลงในแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยา รวมทั้งหลุมที่ว่างเปล่า

11. วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 nm เทียบกับค่าว่าง หรือวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 nm/630-690 nm