Plasma IgM 96pcs ชุดทดสอบ Elisa HAV Diagnos ชุดทดสอบแอนติบอดี

HAV IgM Elisa Kit 96 การทดสอบ/ชุด

แค็ตตาล็อกหมายเลข: BE301A

1. หลักการ

1. ชุดนี้ใช้วิธีจับภาพ ELISA เพื่อตรวจหา IgM ต่อต้าน HAVแอนติบอดีต้าน IgM ของมนุษย์ (μchain) ของหนูเมาส์ที่บริสุทธิ์ถูกเคลือบบนเฟสของแข็งของหลายหลุม
2. คอนจูเกต HAV-Ag ถูกเติมไปยังหลุมที่เคลือบหลังจากตัวอย่างที่เจือจางที่เติมและบ่มจากนั้นเติมฮอร์แรดิชเปอร์ออกซิเดสที่ติดฉลาก HAV-Agถ้า HAV-IgM มีอยู่ในตัวอย่าง จะเกิดสารเชิงซ้อนของ Anti-μ-chain-HAV-IgM –HAV-Ag ที่ติดฉลากด้วย HRP
3. ล้างหลุมเพื่อขจัดส่วนประกอบซีรั่มที่ไม่มีขอบเขตอื่นๆ บ่มด้วยซับสเตรต (TMB) เพื่อสร้างผลิตภัณฑ์ที่มีสี และวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรเพื่อบ่งชี้ว่ามีหรือไม่มี HAV-IgM ในตัวอย่าง
4. การทดสอบเป็นแบบพิเศษ มีความละเอียดอ่อน ทำซ้ำได้ และใช้งานง่าย

2. วัสดุที่จัดเตรียมให้

1. แผ่น Microwell เคลือบ Anti-μ-chain 1 บล็อก (96 ช่อง)
2. เอ็นไซม์คอนจูกันต์ (HAVAg-HRP) 1 ขวด (6ml)
3. คอนจูเกต HAV-Ag 1 ขวด (6ml)
4. เนกาทีฟ คอนโทรล เซรั่ม 1 ขวด (1มล.)
5. Positive Control Serum 1 ขวด (1ml)
6. 20 X Wash Buffer (เจือจางก่อนใช้) 1 ขวด (30ml)
7. ซับสเตรท เอ 1 ขวด (6มล.)
8. สารตั้งต้น B 1 ขวด (6ml)
9. สต็อป โซลูชั่น(2M H2SO4) 1 ขวด (6มล.)
10. ถุงพลาสติก 1 ถุง
11. กระดาษซีล 3 ชิ้น
12. คู่มือ 1 อัน

3. ขั้นตอนการทดสอบ

1. นำ ELISA Kit for Antibody IgM ไปใช้กับไวรัสตับอักเสบเอ (น้ำยาทั้งหมด) และตัวอย่างไปที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน (ประมาณ 30 นาที)

2. น้ำยาล้างบัฟเฟอร์เข้มข้น 1:19 เจือจางด้วย ddH2O

3. เจือจางตัวอย่าง (1:1000) ด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยา

4. สำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง ให้ตั้งค่าตัวควบคุมว่างหนึ่งรายการ ตัวควบคุมค่าบวกสองค่า และค่าลบสามค่าเพิ่มเซรั่มควบคุมบวกและลบ100μlลงในหลุมควบคุมบวกและลบตามลำดับ

5. เพิ่มตัวอย่างที่เจือจาง 100μl ลงในหลุมทดสอบอื่นๆ

6. ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล แล้วบ่ม 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C

7. ทิ้งของเหลวในหลุมทั้งหมดแล้วเติมบ่อน้ำด้วยน้ำยาล้างพักไว้ 15 วินาที ทิ้งของเหลวในบ่อทั้งหมด และเติมสารละลายล้างลงในบ่อทำซ้ำ 5 ครั้ง และเช็ดให้แห้งหลังจากล้างครั้งสุดท้าย

8. เพิ่ม 50 ไมโครลิตรคอนจูเกต HAV-Ag ในแต่ละหลุมยกเว้นช่องว่าง

9. Addμl 50 μl Enzyme Conjugant ในแต่ละหลุมยกเว้นช่องว่าง

10.ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล แล้วบ่ม 30 นาทีที่อุณหภูมิ 37°C

11. ทำซ้ำขั้นตอนที่ 7

12. เติมสารตั้งต้น A และ B 50 ไมโครลิตร ตามลำดับในแต่ละหลุม ผสมเบา ๆ ที่ได้รับการป้องกันจากแสงและบ่ม 15 นาทีที่ 37°C

13. เติมสารละลายสต็อป 50 ไมโครลิตรลงในแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยา รวมทั้งหลุมที่ว่างเปล่า

14. วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตรเทียบกับค่าว่าง หรือวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 450 นาโนเมตร/630-690 นาโนเมตร