HBcAb การทดสอบเลือด Elisa Test Enzyme Linked Immunosorbent Assay

HBcAb Elisa Kit Enzyme Linked Immunosorbent Assay Elisa

HBcAb ELISA Kit
แค็ตตาล็อกหมายเลข: BE105A

1.สรุป

1 ไวรัสตับอักเสบบีเป็นโรคติดต่อที่เกิดจากไวรัสตับอักเสบบี(HBV) ซึ่งเป็นไวรัส DNA แบบสองสายที่ห่อหุ้มอยู่ในตระกูล Hepadnaviridae และได้รับการยอมรับว่าเป็นสาเหตุหลักของโรคตับอักเสบติดต่อทางเลือดร่วมกับไวรัสตับอักเสบซี (HCV)HBV ถูกขับออกทางของเหลวในร่างกาย เช่น น้ำอสุจิ น้ำลาย เลือด และปัสสาวะในผู้ที่ติดเชื้อเฉียบพลันหรือเรื้อรัง

2 ไวรัสตับอักเสบบีเรียกว่าไวรัสที่เกิดจากเลือดเพราะติดต่อจากคนหนึ่งไปยังอีกคนหนึ่งผ่านทางเลือดหรือของเหลวที่ปนเปื้อนด้วยเลือด

3 การแพร่เชื้อไวรัสตับอักเสบบีเป็นผลมาจากการสัมผัสกับเลือดที่ติดเชื้อหรือของเหลวในร่างกาย เมื่อ HBV บุกรุกร่างกายจะทำให้ตับถูกทำลายโดยการเหนี่ยวนำภูมิคุ้มกันอัตโนมัติ

•  
• 2. วัสดุที่จัดเตรียมให้

1.ไมโครเพลท 1 บล็อก (96 หลุม)
2.การควบคุมเชิงลบ 1 มล. ×1
3.Positive Control 1 มล. ×1
4.คอนจูเกต 6 มล. ×1
5.น้ำยารองพื้น A 6 มล. ×1
6.น้ำยารองพื้น B 6 มล. ×1
7.20×บัฟเฟอร์ล้าง 40 มล. ×1
8.สต็อป โซลูชั่น 6 มล. ×1
9.ฝาครอบจาน 3 ชิ้น
10.แทรก 1 สำเนา

3 วัสดุที่จำเป็นแต่ไม่ได้จัดเตรียมไว้

1. ไมโครปิเปต: 0.02, 0.05, 0.10, 0.15, 0.20 และ 1.0 มล.

2. เคล็ดลับปิเปตแบบใช้แล้วทิ้ง

3. น้ำกลั่นหรือน้ำปราศจากไอออน

4. กล่องความชื้นสามารถรักษา 37°C

5. กระดาษดูดซับหรือกระดาษเช็ดมือ

6. แผ่นไมโครไทเทอร์หรือแหวนรองแถบ

7. เครื่องอ่านเพลท Microtiter ที่มีความยาวคลื่น 450 นาโนเมตร (หรือ 450 นาโนเมตร/630 นาโนเมตร)

8. ตัวจับเวลา

กระบวนการทดสอบ

1. นำ ELISA Kit (รีเอเจนต์ทั้งหมด) และตัวอย่างไปที่อุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน (ประมาณ 30 นาที)

2. ตรวจสอบ Wash buffer Concentrated ว่ามีผลึกเกลืออยู่หรือไม่หากเกิดผลึกในสารละลาย ให้ละลายโดยการให้ความร้อนที่ 37℃ จนกระทั่งผลึกละลายน้ำยาล้างบัฟเฟอร์เข้มข้น 1:19 เจือจางด้วย ddH₂O. ใช้ภาชนะที่สะอาดเท่านั้นเพื่อเจือจางบัฟเฟอร์

3. สำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง ให้ตั้งค่าว่างหนึ่งรายการ ตัวควบคุมค่าบวกสองค่าและค่าลบสองค่าเพิ่ม 50μl Positive control, Negative control และ Specimen ลงในหลุมตามลำดับเติม HRP-Conjugate 50μl ลงในแต่ละหลุม ยกเว้น Blank และผสมโดยแตะเพลทเบาๆไม่ควรเพิ่มตัวอย่างหรือ HRP-Conjugate ลงในช่องว่าง

4. ปิดหลุมด้วยกระดาษซีล และวางแผ่นไมโครไทเทอร์ลงในกล่องที่มีความชื้นและฟักที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 30 นาที

5. ทิ้งของเหลวในหลุมทั้งหมดแล้วเติมบ่อน้ำด้วยน้ำยาล้างพักไว้ 15 วินาที ทิ้งของเหลวในบ่อทั้งหมด และเติมสารละลายล้างลงในบ่อทำซ้ำ 5 ครั้ง และปิดขอบหลุมบนกระดาษซับน้ำเป็นเวลาสองสามวินาทีหลังจากล้างครั้งสุดท้าย

6. เพิ่มสารตั้งต้น A และ B 50μl ตามลำดับในแต่ละหลุมรวมทั้งหลุมว่างผสมเบา ๆ ป้องกันไม่ให้ถูกแสงและบ่ม 15 นาทีที่ 37°C

7. เติม Stop Solution หนึ่งหยด (50 ul) ลงในแต่ละหลุมรวมทั้งหลุมว่างเพื่อหยุดปฏิกิริยาของสี

8. อ่านค่า OD ที่ 450 nm/630 nm ด้วยเครื่องอ่านแผ่นกรองคู่เป็นตัวเลือกในการอ่านค่า OD ที่ 450 นาโนเมตรด้วยเครื่องอ่านแผ่นกรองเดี่ยว(ใช้ค่า OD ของหลุมว่างเพื่อแก้ไขค่า OD ที่อ่านได้จากหลุมทั้งหมด)