คิตทดสอบ IRISIN ELISA ของมนุษย์

การใช้

ชุดนี้ทําให้สามารถกําหนดความถี่ของไอริซินในเซรั่มของมนุษย์ พลาสมาและของเหลวทางชีวภาพอื่น ๆ

ขั้นตอนการตรวจสอบ

1.ละลายและเพิ่มตัวอย่าง:ละลาย ความหนาแน่นเดิม มาตรฐานตามตารางต่อไปนี้:

2.เพิ่มตัวอย่าง: วางถังตัวอย่างว่างแยกกัน (ถังตัวอย่างว่างสําหรับการเปรียบเทียบไม่เพิ่มตัวอย่างและ HRP-Conjugate reagent นอกจากนี้ทุกขั้นตอนการปฏิบัติงานก็เหมือนกัน)เพิ่ม 50μl ของสแตนดาร์ตไปยัง Microelisa stripplate, เพิ่มตัวอย่างละลาย 40μl ไปยังตัวอย่างการทดสอบ ถ้ํา, จากนั้นเพิ่มตัวอย่างการทดสอบ 10μl (ตัวอย่างการละลายสุดท้ายเป็น 5 เท่า), เพิ่มตัวอย่างไปยังบ่อน, ไม่สัมผัสผนังบ่อนเท่าที่จะเป็นไปได้, และผสมให้ละเอียด.

3.ฝัง: หลังจากปิดจานด้วยเยื่อจานปิดฝัง 30 นาทีที่ 37 °C

4.จัดตั้งของเหลว: 30 (หรือ 20) ครั้งของสารล้างละลาย 30 (หรือ 20) ครั้งของน้ําหมักและสํารอง

5.ล้าง: เปิดแผ่นปิดเยื่อ, ทิ้งเหลว, แห้งด้วยการสวิง, เพิ่มผงล้างทุกบ่อ, ยังคง 30s แล้วระบายน้ํา, ย้ํา 5 ครั้ง, แห้งด้วยการตี.

6.เพิ่มเติมเอนไซม์:เพิ่มสารปฏิกิริยา HRP-Conjugate 50μl ในแต่ละหลุม ยกเว้นหลุมว่าง

7.อุปกรณ์ปลูก: การดําเนินงานกับ 3.

8การซักผ้า: การดําเนินงานกับ 5

9.color: เพิ่ม Chromogen Solution A 50ul และ Chromogen Solution B 50ul ไปยังหลุมแต่ละหลุม, หลีกเลี่ยงการอนุรักษ์แสง 10 นาทีที่ 37 °C

10.หยุดปฏิกิริยา: เพิ่ม Stop Solution50μl ไปยังแต่ละหลุม, หยุดปฏิกิริยา ((สีน้ําเงินเปลี่ยนเป็นสีเหลือง)

11.การทดสอบ: คว้าถ้ําว่างเป็นศูนย์, อ่านการดูดซึมที่ 450nm หลังจากการเพิ่มสารหยุดและภายใน 15 นาที

ความต้องการตัวอย่าง

1การสกัดตัวอย่างให้เร็วที่สุดเท่าที่จะทําได้ และตามหนังสือที่เกี่ยวข้อง และควรทําการทดลองเร็วที่สุดเท่าที่จะทําได้หลังจากการสกัดตัวอย่างตัวอย่างสามารถเก็บรักษาได้ที่ -20 °C เพื่อรักษาหลีกเลี่ยงวินิจฉัยการแช่แข็ง-ไหลที่ซ้ํา

2ไม่สามารถตรวจสอบตัวอย่างที่มี NaN3 เพราะ NaN3 ละเมิด HRP ที่มีผล

3การสกัดตัวอย่างให้เร็วที่สุดเท่าที่จะทําได้ และตามหนังสือที่เกี่ยวข้อง และควรทําการทดลองเร็วที่สุดเท่าที่จะทําได้หลังจากการสกัดตัวอย่างตัวอย่างสามารถเก็บรักษาได้ที่ -20 °C เพื่อรักษาหลีกเลี่ยงวินิจฉัยการแช่แข็ง-ไหลที่ซ้ํา

4ไม่สามารถตรวจพบตัวอย่างที่มี NaN3 เพราะ NaN3 ละเมิด HRP ที่มีผล

หมายเหตุสําคัญ

• ชุดเอาออกจากสภาพแวดล้อมเย็น ควรสมดุล 15-30 นาทีในอุณหภูมิห้องพล็อตควรเก็บไว้ในถุงปิด.
• การล้างพัฟเฟอร์จะแยกกระจก, มันสามารถถูกทําความร้อนน้ําช่วยละลายเมื่อละลาย. การล้างไม่ส่งผลต่อผล.
• เพิ่มตัวอย่างกับตัวอย่างทุกขั้นตอน, และตรวจสอบความแม่นยําของมันบ่อย ๆ, หลีกเลี่ยงความผิดพลาดการทดลอง. เพิ่มตัวอย่างภายใน 5 นาที, หากจํานวนตัวอย่างมาก, แนะนําการใช้ Volley.
• หากสารในการทดสอบมีปริมาณสูงเกินไป (ตัวอย่าง OD ใหญ่กว่าหลุมมาตรฐานแรก ), กรุณาละลายตัวอย่าง (n-fold), กรุณาละลายและคูณด้วยปริมาณละลาย(×n×5).
• เปลือกแผ่นปิดจํากัดการใช้ครั้งเดียวเท่านั้น เพื่อหลีกเลี่ยงการติดเชื้อข้าม
• สารสับสราทหลบเลี่ยงการรักษาแสง.
• กรุณาใช้ตามคําแนะนําอย่างเคร่งครัด การกําหนดผลการทดสอบต้องใช้เครื่องอ่านจาน microtiter เป็นมาตรฐาน
• ตัวอย่างทั้งหมด, ปั๊มล้างและแต่ละชนิดของขยะควรตามกระบวนการของสารติดเชื้อ
• อย่าผสมสารทดลองกับสารทดลองจากชุดอื่น