ชุดทดสอบ Sandwich Elisa VD3 RUO ชุดทดสอบวิตามิน D3 Elisa สำหรับใช้ในการวิจัย

วิตามิน D3 ของมนุษย์;VD3 ELISA Kit

• วันหมดอายุ:หกเดือน.
• การจัดเก็บ: 2-8 ℃.
• ชุด ELISA วิตามินดี3 ของมนุษย์ (VD3) ของเราคือการทดสอบระดับวิตามินดี3 (VD3) ในซีรัม พลาสมา สื่อการเพาะเลี้ยงหรือของเหลวทางชีววิทยาใดๆ ของมนุษย์

หลักการ

  ชุด ELISA นี้ใช้ Sandwich-ELISA เป็นวิธีการแผ่นลอกไมโครเอลิซาที่ให้มาในชุดอุปกรณ์นี้ได้รับการเคลือบล่วงหน้าด้วยแอนติบอดีจำเพาะสำหรับวิตามินดี 3 (VD3)มาตรฐานหรือตัวอย่างจะถูกเพิ่มลงในหลุม Stripplate Microelisa ที่เหมาะสมและรวมเข้ากับแอนติบอดีจำเพาะจากนั้น ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (HRP) - แอนติบอดีคอนจูเกตที่จำเพาะสำหรับวิตามินดี 3 (VD3) จะถูกเพิ่มลงในแผ่นไมโครเอลิซาแต่ละแผ่นและบ่มเพาะส่วนประกอบฟรีจะถูกชะล้างออกไปเพิ่มสารละลายซับสเตรตของทีเอ็มบีในแต่ละหลุมเฉพาะบ่อที่มีแอนติบอดีวิตามิน D3 (VD3) และ HRP conjugated Vitamin D3 (VD3) เท่านั้นที่จะปรากฏเป็นสีน้ำเงินและเปลี่ยนเป็นสีเหลืองหลังจากเติมสารละลายสต็อปความหนาแน่นของแสง (OD) ถูกวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกที่ความยาวคลื่น 450 นาโนเมตรค่า OD เป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของวิตามิน D3 (VD3)คุณสามารถคำนวณความเข้มข้นของวิตามินดี3 (VD3) ในตัวอย่างได้โดยการเปรียบเทียบค่า OD ของตัวอย่างกับเส้นโค้งมาตรฐาน

วัสดุที่มาพร้อมกับชุดอุปกรณ์

• การเจือจางมาตรฐาน

บ่อสิบหลุมถูกกำหนดให้เป็นมาตรฐานในแผ่นเหล็กแผ่นไมโครเอลิซาใน Well 1 และ Well 2 จะมีการเพิ่มสารละลายมาตรฐาน100μlและบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันใน Well 3 และ Well 4 จะมีการเติมสารละลาย100μlจาก Well 1 และ Well 2 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันสารละลาย 50μl ถูกทิ้งจาก Well 3 และ Well 4 ใน Well 5 และ Well 6 จะมีการเติมสารละลาย50μlจาก Well 3 และ Well 4 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันใน Well 7 และ Well 8 จะมีการเติมสารละลาย50μlจาก Well 5 และ Well 6 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันใน Well 9 และ Well 10 จะมีการเติมสารละลาย50μlจาก Well 7 และ Well 8 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันสารละลาย 50μl ถูกทิ้งจาก Well 9 และ Well 10 หลังจากการเจือจาง ปริมาตรทั้งหมดในหลุมทั้งหมดคือ 50μl และความเข้มข้นคือ 30 ng/ml, 20 ng/ml, 10 ng/ml, 5 ng/ml และ 2.5 ng/ มล. ตามลำดับ

การคำนวณผลลัพธ์

ความเข้มข้นที่ทราบของมาตรฐานวิตามินดี 3 ของมนุษย์ (VD3) และค่า OD การอ่านที่สอดคล้องกันนั้นถูกพล็อตบนมาตราส่วนบันทึก (แกน x) และมาตราส่วนบันทึก (แกน y) ตามลำดับความเข้มข้นของวิตามินดี3 ของมนุษย์ (VD3) ในตัวอย่างถูกกำหนดโดยการพล็อตค่า OD ของตัวอย่างบนแกน Yความเข้มข้นดั้งเดิมคำนวณโดยการคูณปัจจัยการเจือจาง

ความแม่นยำ

ความแม่นยำในการทดสอบภายใน (ความแม่นยำภายในการทดสอบ): ตัวอย่าง 3 ตัวอย่างที่มีวิตามินดี 3 ของมนุษย์ (VD3) ในระดับต่ำ กลาง และสูง ได้รับการทดสอบ 20 ครั้งในจานเดียวตามลำดับ

Inter-assay Precision (ความแม่นยำระหว่างการทดสอบ): ตัวอย่าง 3 ตัวอย่างที่มีวิตามินดี 3 ของมนุษย์ (VD3) ในระดับต่ำ กลาง และสูง ได้รับการทดสอบบนเพลตที่แตกต่างกัน 3 แผ่น โดยแต่ละแผ่นมีการจำลอง 8 ชุด

CV(%) = SD/ค่าเฉลี่ยX100

การทดสอบภายใน: CV<10%

ระหว่างการทดสอบ: CV<12%

ช่วงการทดสอบ

0.8 ng/ml -36 ng/ml

ความไว:

0.3 ng/ml

• เก็บชุดอุปกรณ์ที่อุณหภูมิ 4°C เมื่อได้รับ ชุดควรได้รับการปรับสมดุลให้อยู่ในอุณหภูมิห้องก่อนการทดสอบแกะแถบที่ไม่จำเป็นออกจากแผ่นเคลือบแอนติบอดี Human Vitamin D3 (VD3) แล้วปิดผนึกด้วยฟอยล์แบบซิปล็อค และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C
• ควรรวมเส้นโค้งมาตรฐานไว้ในการทดสอบทุกครั้งขอแนะนำบ่อจำลองหากค่า OD ของตัวอย่างมากกว่าหลุมมาตรฐานที่ 1 โปรดเจือจางตัวอย่าง (n ครั้ง) ก่อนการทดสอบเมื่อคำนวณความเข้มข้นของวิตามินดี 3 (VD3) ดั้งเดิม โปรดคูณปัจจัยการเจือจางทั้งหมด (XnX5)