Interleukin-2 Receptor Subunit Alpha Mouse IL2R CD25 IL2-RA ELISA Kit

หน่วยย่อยอัลฟาของตัวรับ Interleukin-2 ของเมาส์;IL2R;ชุด CD25;IL2-RA ELISA

วัสดุที่มาพร้อมกับชุดอุปกรณ์

ข้อกำหนดของตัวอย่าง

• เซรั่ม-จับตัวเป็นก้อนที่อุณหภูมิห้อง 10-20 นาที ปั่นเหวี่ยง 20 นาทีที่ความเร็ว 2000-3000 รอบต่อนาที ขจัด supernatant ถ้าเกิดฝนตก ให้หมุนเหวี่ยงอีกครั้ง
• พลาสม่า-ใช้ EDTA ที่เหมาะสมหรือพลาสมาซิเตรตเป็นสารกันเลือดแข็ง ผสม 10-20 นาที ปั่นแยก 20 นาทีที่ความเร็ว 2,000-3,000 รอบต่อนาที ขจัด supernatant หากเกิดการตกตะกอน ให้หมุนเหวี่ยงอีกครั้ง
• ปัสสาวะ- รวบรวมฟ้องภาชนะปลอดเชื้อ หมุนเหวี่ยง 20 นาทีที่ความเร็ว 2000-3000 รอบต่อนาทีเอา supernatant ออก ถ้าปรากฏการตกตะกอน แรงเหวี่ยงอีกครั้งการทำงานของ Hydrothorax และน้ำไขสันหลัง อ้างอิงถึงมัน
• สารเหนือตะกอนการเพาะเลี้ยงเซลล์- ตรวจจับส่วนประกอบของสารคัดหลั่ง รวบรวมฟ้องภาชนะปลอดเชื้อ หมุนเหวี่ยง 20 นาทีที่ความเร็ว 2,000-3,000 รอบต่อนาที กำจัดส่วนลอยเหนือตะกอน ตรวจจับองค์ประกอบของเซลล์ สารแขวนลอยเซลล์เจือจางด้วย PBS(PH7.2-7.4) ความเข้มข้นของเซลล์ถึง 1 ล้าน / ml, รอบการแช่แข็งละลายซ้ำ, ทำลายเซลล์และปล่อยส่วนประกอบภายในเซลล์, การหมุนเหวี่ยง 20 นาทีที่ความเร็ว 2,000-3,000 รอบต่อนาทีเอา supernatant ออก, หากเกิดการตกตะกอน ให้หมุนเหวี่ยงอีกครั้ง
• ตัวอย่างเนื้อเยื่อ- หลังจากตัดตัวอย่าง ให้ตรวจสอบน้ำหนัก เพิ่ม PBS(PH7.2-7.4) แช่แข็งอย่างรวดเร็วด้วยไนโตรเจนเหลว รักษาตัวอย่างที่อุณหภูมิ 2-8 ℃ หลังจากหลอมเหลว เพิ่ม PBS(PH7.4) ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยมือหรือเครื่องบด การหมุนเหวี่ยง 20 นาทีที่ความเร็ว 2,000-3,000 รอบต่อนาที ขจัด supernatant
• สกัดโดยเร็วที่สุดหลังจากการเก็บตัวอย่างและตามวรรณกรรมที่เกี่ยวข้องและควรทดลองโดยเร็วที่สุดหลังจากการสกัดหากไม่สามารถทำได้ สามารถเก็บตัวอย่างที่อุณหภูมิ -20 ℃ เพื่อถนอมอาหาร หลีกเลี่ยงรอบการแช่แข็งและละลายซ้ำ
• ตรวจไม่พบตัวอย่างที่มี NaN3 เนื่องจาก NaN3 ยับยั้ง HRP ที่ทำงานอยู่

หลักการ

ชุด ELISA นี้ใช้ Sandwich-ELISA เป็นวิธีการแผ่นปิด Microelisa ที่ให้มาในชุดอุปกรณ์นี้ได้รับการเคลือบล่วงหน้าด้วยแอนติบอดีจำเพาะสำหรับIL2R.มาตรฐานหรือตัวอย่างจะถูกเพิ่มลงในหลุม Stripplate Microelisa ที่เหมาะสมและรวมเข้ากับแอนติบอดีจำเพาะจากนั้น ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (HRP) - แอนติบอดีคอนจูเกตที่จำเพาะสำหรับIL2Rถูกเพิ่มเข้าไปในแผ่นเพลตไมโครเอลิซาแต่ละอันและบ่มเพาะส่วนประกอบฟรีจะถูกชะล้างออกไปเพิ่มสารละลายซับสเตรตของทีเอ็มบีในแต่ละหลุมเฉพาะบ่อน้ำที่มีIL2Rและ HRP conjugated thrombomodulin antibody จะปรากฏเป็นสีน้ำเงินและเปลี่ยนเป็นสีเหลืองหลังจากเติมสารละลายสต็อปความหนาแน่นของแสง (OD) ถูกวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกที่ความยาวคลื่น 450 นาโนเมตรค่า OD เป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของIL2R.คุณสามารถคำนวณความเข้มข้นของIL2Rในตัวอย่างโดยเปรียบเทียบ OD ของตัวอย่างกับเส้นโค้งมาตรฐาน

หมายเหตุ:

• เก็บชุดอุปกรณ์ที่อุณหภูมิ 4°C เมื่อได้รับ ชุดควรได้รับการปรับสมดุลให้อยู่ในอุณหภูมิห้องก่อนการทดสอบนำแถบที่ไม่จำเป็นออกจากแผ่นเคลือบแอนติบอดี IL2R แล้วปิดผนึกด้วยฟอยล์แบบซิปล็อค และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4°C
• ตะกอนอาจปรากฏขึ้นในบัฟเฟอร์สำหรับล้างแบบเข้มข้นโปรดให้ความร้อนบัฟเฟอร์เพื่อละลายตะกอนทั้งหมดซึ่งจะไม่ส่งผลต่อผลลัพธ์
• ควรใช้ปิเปตที่ถูกต้องเพื่อหลีกเลี่ยงข้อผิดพลาดในการทดลองควรเพิ่มตัวอย่างลงในไมโครเพลทภายในเวลาไม่ถึง 5 นาทีหากมีตัวอย่างจำนวนมาก ขอแนะนำให้ใช้ปิเปตหลายช่อง
• ควรรวมเส้นโค้งมาตรฐานไว้ในการทดสอบทุกครั้งขอแนะนำบ่อจำลองหากค่า OD ของตัวอย่างมากกว่าหลุมมาตรฐานที่ 1 โปรดเจือจางตัวอย่าง (n ครั้ง) ก่อนการทดสอบเมื่อคำนวณความเข้มข้นของ thrombomodulin เดิม โปรดคูณปัจจัยการเจือจางทั้งหมด (XnX5)
• เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนข้าม เครื่องซีลไมโครเพลทมีไว้สำหรับใช้เพียงครั้งเดียวเท่านั้น
• โปรดเก็บวัสดุพิมพ์ให้ห่างจากแสง
• การดำเนินการทั้งหมดควรเป็นไปตามคำแนะนำของผู้ผลิตอย่างเคร่งครัดผลลัพธ์ที่กำหนดโดยเครื่องอ่านเพลท Microtiter
• ตัวอย่างทั้งหมด บัฟเฟอร์สำหรับล้าง และของเสียควรได้รับการปฏิบัติเหมือนเป็นสารติดเชื้อ
• ไม่ควรผสมรีเอเจนต์จากล็อตต่างๆ