RUO HBcAb Elisa คิท

วัตถุประสงค์ของ RUO HBcAb ELISA Test คือการตรวจหาคุณภาพของแอนติบอดีต่อ Core antigen ของไวรัสตับอักเสบ B ในเซรม / พลาสมาของมนุษย์

ในฐานะเป็นส่วนหนึ่งของตระกูล Hepadnaviridae, HBV เป็นไวรัส DNA ที่มีเชื้อรังสองเชื้อรังที่ปกคลุม ซึ่งเป็นสาเหตุหลักของการติดเชื้อโรคตับอักเสบผ่านเลือดผล ของ โรค โรค ไวรัส ขับกระเพาะเลือดอุดตัน, ซึ่งรวมถึงปัญหาตับเรื้อรัง เช่น มะเร็งและเส้นเลือดขอดตัวชี้วัดทางเชื้อโรคต้องถูกระบุในช่วง 3 ขั้นตอนของการติดเชื้อ - อุจจาระสารประกอบหลักของไวรัสคือ แอนติเจนเบื้องต้นของโรคตับอักเสบ B (HBcAg)แอนติเจนแกนนี้ประกอบด้วยโพลีเพปติดตัวเดียวประมาณ 17kD ซึ่งถูกปล่อยเมื่ออนุภาคแกนถูกแยกแยก. อย่างน้อยมีตัวกําหนดภูมิคุ้มกันหนึ่งตัวอยู่ในแอนติเจน ไม่นานหลังจากการเริ่มต้นของ HBsAg แอนติบอดีต่อ HBcAg (แอนติบอดีรวมและ IgM ต่อ HBc) ปรากฏขึ้นและไม่หายไป,การติดเชื้อไวรัสตับอักเสบ B สามารถติดเชื้อได้โดยไม่ต้องใช้ยาต้าน HBc ที่ตรวจพบทางภูมิคุ้มกัน โดยทั่วไปพบในผู้ป่วยที่มีภูมิคุ้มกันการสกรีนสําหรับแอนติ HBc ส่งผลให้มีข้อมูลเกี่ยวกับการแพร่ระบาดของโรคตับอักเสบ B ในประชากรที่แตกต่างกัน. เหตุผลก็คือ แอนติ-HBc เป็นเครื่องหมายของการติดเชื้อ HBV รุนแรง, โรคเรื้อรัง, หรือหายไป. การระบุแอนติ-HBc เป็นสิ่งสําคัญเมื่อมีการวินิจฉัยในสถานการณ์ทางคลินิกพร้อมกับการตรวจเชื้อไวรัสตับอักเสบ B อื่นๆ, ตัวตรา anti-HBc ทําให้การวินิจฉัยถูกต้องและการติดตามการพัฒนาของไวรัสอย่างเหมาะสมแอนติ-HBc อาจเป็นตัวชี้แจงเดียวของการติดเชื้อไวรัสตับอักเสบ B (รวมถึงการทดสอบอื่นๆ ของผู้ป่วย HBsAg ลบ).

วัสดุและส่วนประกอบ

มิกรอพลาต:แผ่นไมโครเวลว่างติดตั้งบนตัวถือแผ่นสีขาว แผ่นถูกปิดในกระเป๋าอลูมิเนียมด้วยสารแห้ง แต่ละหลุมมี HBcAg ที่ระบายความสะอาด แผ่นไมโครเวลสามารถหักเพื่อใช้เป็นส่วนตัววางหลุมหรือแผ่นที่ไม่ได้ใช้ไว้ในถุงเก็บพลาสติกที่ปิดได้พร้อมกับยาแห้ง และนํากลับไป 2-8 °Cเมื่อเปิดแล้วคงที่ 1 เดือนที่ 2- 8 °C

การควบคุมลบ:(1x1. 0 มิลลิลิตรต่อถัง)00. 1% ProClinTM 300 น้ําเหลืองใส เติมในถังที่มีฝาปิดสกรูสีเขียว พรอตีนที่ทําให้ความมั่นคงของพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพัสดุพ

การควบคุมบวก:(1x1. 0 มิลลิลิตรต่อถัง)0.1% ProClinTM 300 น้ํายาสีแดง เติมในกระป๋องยาที่มีฝาปิดสกรูสีแดง HBcAb น้ํายาลดในผงพัสดุปัสดุปัสดุปัสดุปัสดุปัสดุปัสดุปัสดุปัสดุ พร้อมใช้ตามที่นํามาพร้อม เมื่อเปิดแล้วคงที่ 1 เดือนที่ 2- 8 °C

คอนจูเกต:(1x6 ml ต่อกล่อง)0.1% ProClinTM 300 น้ํายาสีแดงในยาฉีดสีขาว มีปลายสกรูสีแดงมีความมั่นคง 1 เดือนที่ 2-8 °C.

วอชบัฟเฟอร์:(1x20 ml ต่อขวด) ลดน้ําก่อนใช้ยาซักฟอก Tween-20 น้ําเหลวไร้สี เติมในขวดสีขาว4, 20 × PBS คอนเซ็นทรัดต้องละลาย1 ถึง 19ด้วยน้ําระบายน้ํา/น้ําหยาดก่อนการใช้ เมื่อละลายแล้วคงที่ 1 สัปดาห์ที่อุณหภูมิห้อง หรือ 2 สัปดาห์เมื่อเก็บไว้ที่ 2-8 °C

สับสราท A:(1x6 ml ต่อกล่อง) น้ํายาไร้สี เติมในกล่องสีขาวที่มีปลายสกรูสีเขียว

สับสราท B:(1x6 ml ต่อกล่อง) น้ํายาไร้สี เติมในกล่องสีดําที่มีปลายสกรูสีดํา

สต็อปคําตอบ:(1x6ml ต่อกล่อง) น้ําเหลวไร้สีในกล่องสีขาวที่มีปลายสกรูสีขาว₂SO₄) เตรียมใช้ตามที่นํามา. เมื่อเปิดแล้วคงที่ 1 เดือนที่ 2- 8 °C

กระเป๋าพลาสติกที่ปิดได้สําหรับปิดแผ่นที่ไม่ได้ใช้ 1 หน่วย

สารประกอบ1 สําเนา

กรอบแผ่นกระดาษกรอง2แผ่น

เพื่อปกคลุมแผ่นในระหว่างระบายน้ํา และป้องกันการระเหยหรือปนเปื้อนของบ่อน้ํา

การดําเนินคดี

การเตรียมสารปฏิกิริยาให้สารปฏิกิริยาบรรลุอุณหภูมิห้อง (18-30°C) น้ําผสมระบายน้ํา (20X) ตามที่ระบุในคําแนะนําในการล้างใช้น้ํากระป๋องหรือน้ําไม่กระป๋อง และใช้อุปกรณ์ที่สะอาดเท่านั้นเพื่อปรับน้ําผสม.สารปฏิกิริยาอื่นๆ ทั้งหมดคือพร้อมใช้ตามที่จัดส่ง.

1. การเตรียม:ปรับปรุงหลุมของไมโครเพลต เพื่อตัวอย่างผู้ป่วยและตัวอย่างที่ต้องทดสอบ ใส่แผ่นไมโครเพลตที่ไม่ได้ใช้ในกระเป๋าอะลูมิเนียมและเก็บไว้ที่ 2-8 °C
2. การเพิ่มตัวอย่าง:เพิ่ม 50μl ของตัวควบคุมหรือตัวอย่างเข้าไปในบ่อที่กําหนดไว้
3. การเพิ่มตัวประกอบ:เพิ่ม 50μl ของคอนจูเกทในทุกบ่อน้ํา ยกเว้นบล็อค
4. การอุปสรรค:ครอบคลุมจานด้วยฝาจานและปัก 3 ครั้ง0 นาที37 °C
5. การล้าง:เมื่อสิ้นสุดการหมัก, ถอนและโยนปิดจาน. ล้างแต่ละบ่อน้ํา 5 ครั้งด้วย Wash Buffer ที่ละลาย. ทุกครั้งปล่อยให้ไมโครบ่อนน้ํา 30-60 วินาที.หลังจากรอบล้างครั้งสุดท้าย, หมุนแผ่นลงบนกระดาษสับ หรือผ้าเช็ดสะอาด และแตะมันเพื่อกําจัดเศษเหลือ
6. การเพิ่ม Substrate:เพิ่ม 50μl ของสารละลาย substrate A และ 50μl ของสารละลาย substrate B ในแต่ละบ่อ10 นาที37 °C หลีกเลี่ยงแสง
7. การเพิ่ม Stop Solution:โดยใช้ pipette หลายช่องหรือด้วยมือ50μฉันใส่ Stop Solution ลงไปในหลุมแต่ละหลุม และผสมให้ละเอียด
8. การวัดการดูดซึม:ปรับขนาดเครื่องอ่านแผ่นด้วยบล็อคพูลและอ่านการดูดซึมที่450nm. หากใช้เครื่องมือกรองสองเครื่อง ปรับความยาวคลื่นมาตรฐานเป็น630nm.คํานวณค่าตัดและประเมินผล (หมายเหตุ:อ่านความซึมซึมภายใน10 นาทีหลังจากหยุดปฏิกิริยา)