|
รายละเอียดสินค้า:
|
| วัตถุประสงค์: | เพื่อการวิจัยเท่านั้น | พื้นที่จัดเก็บ: | 2-8℃ |
|---|---|---|---|
| ข้อมูลจำเพาะ: | 48wells/96wells | วิธี: | แซนวิช |
| Cat. แมว. No. ไม่.: | In-Mo1153 | ประวัติย่อ(%): | SD/ค่าเฉลี่ยX100 |
| เน้น: | E Cadherin Elisa Kit,เมาส์ E Cad Elisa Kit,งานวิจัย E Cadherin Elisa Kit |
||
เมาส์ E-Cadherin,E-Cad ELISA Kit
ชุด ELISA นี้ใช้ Sandwich-ELISA เป็นวิธีการแผ่นปิด Microelisa ที่ให้มาในชุดอุปกรณ์นี้ได้รับการเคลือบล่วงหน้าด้วยแอนติบอดีจำเพาะสำหรับ E-Cadมาตรฐานหรือตัวอย่างจะถูกเพิ่มลงในหลุม Stripplate Microelisa ที่เหมาะสมและรวมเข้ากับแอนติบอดีจำเพาะจากนั้น ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (HRP)- แอนติบอดีคอนจูเกตที่จำเพาะสำหรับ E-Cad จะถูกเติมลงในแผ่นเหล็กไมโครเอลิซาแต่ละแผ่นและบ่มเพาะส่วนประกอบฟรีจะถูกชะล้างออกไปเพิ่มสารละลายซับสเตรตของทีเอ็มบีในแต่ละหลุมเฉพาะหลุมที่มี E-Cad และ HRP คอนจูเกตแอนติบอดี E-Cad เท่านั้นที่จะปรากฏเป็นสีน้ำเงินและเปลี่ยนเป็นสีเหลืองหลังจากเติมสารละลายสต็อปความหนาแน่นของแสง (OD) ถูกวัดด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกที่ความยาวคลื่น 450 นาโนเมตรค่า OD เป็นสัดส่วนกับความเข้มข้นของ E-Cadคุณสามารถคำนวณความเข้มข้นของ E-Cad ในตัวอย่างได้โดยการเปรียบเทียบ OD ของตัวอย่างกับเส้นโค้งมาตรฐาน
วัสดุที่มาพร้อมกับชุดอุปกรณ์
| วัสดุที่มาพร้อมกับชุดอุปกรณ์ | 48 ความมุ่งมั่น | 96 ความมุ่งมั่น | พื้นที่จัดเก็บ | |
| 1 | คู่มือการใช้ | 1 | 1 | RT |
| 2 | เมมเบรนแผ่นปิด | 2 | 2 | RT |
| 3 | ถุงปิดผนึก | 1 | 1 | RT |
| 4 | แผ่นเปลื้องผ้าไมโครเอลิซา | 1 | 1 | 2-8℃ |
| 5 | มาตรฐาน: 108pg/ml | 0.5ml×1ขวด | 0.5ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 6 | สารเจือจางมาตรฐาน | 1.5ml×1ขวด | 1.5ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 7 | HRP-คอนจูเกตรีเอเจนต์ | 3ml×1ขวด | 6ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 8 | สารเจือจางตัวอย่าง | 3ml×1ขวด | 6ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 9 | สารละลายโครโมเจน A | 3ml×1ขวด | 6ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 10 | สารละลายโครโมเจน B | 3ml×1ขวด | 6ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 11 | หยุดโซลูชั่น | 3ml×1ขวด | 6ml×1ขวด | 2-8℃ |
| 12 | น้ำยาล้าง | 20มล. (20X)×1ขวด | 20มล. (30X)×1ขวด | 2-8℃ |
ขั้นตอน
การเจือจางมาตรฐาน
1.สิบหลุมถูกกำหนดให้เป็นมาตรฐานในแผ่นเหล็กแผ่นไมโครเอลิซาใน Well 1 และ Well 2 จะมีการเพิ่มสารละลายมาตรฐาน100μlและบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันใน Well 3 และ Well 4 จะมีการเติมสารละลาย100μlจาก Well 1 และ Well 2 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันสารละลาย 50μl ถูกทิ้งจาก Well 3 และ Well 4 ใน Well 5 และ Well 6 จะมีการเติมสารละลาย50μlจาก Well 3 และ Well 4 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันใน Well 7 และ Well 8 จะมีการเติมสารละลาย50μlจาก Well 5 และ Well 6 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันใน Well 9 และ Well 10 จะมีการเติมสารละลาย50μlจาก Well 7 และ Well 8 ตามลำดับจากนั้นเติมบัฟเฟอร์เจือจางมาตรฐาน50μlและผสมให้เข้ากันสารละลาย 50μl ถูกทิ้งจาก Well 9 และ Well 10 หลังจากการเจือจาง ปริมาตรทั้งหมดในหลุมทั้งหมดคือ 50μl และความเข้มข้นคือ 24ng/ml, 16 ng/ml,8 ng/ml,4ng/ml และ 2ng/ml ตามลำดับ .
2. ใน Stripplate ของ Microelisa ให้เว้นช่องว่างไว้เป็นตัวควบคุมว่างในหลุมตัวอย่าง จะมีการเติมบัฟเฟอร์การเจือจางตัวอย่าง40μlและตัวอย่าง10μl (ปัจจัยการเจือจางคือ 5)ควรใส่ตัวอย่างลงด้านล่างโดยไม่ต้องสัมผัสผนังของบ่อผสมให้เข้ากันด้วยการเขย่าเบาๆ
3. การฟักไข่: ฟักไข่ 30 นาทีที่ 37 ℃ หลังจากปิดผนึกด้วยเมมเบรนแผ่นปิด
4. การเจือจาง: เจือจางบัฟเฟอร์ล้างเข้มข้นด้วยน้ำกลั่น (30 ครั้งสำหรับ 96T และ 20 เท่าสำหรับ 48T)
5. การซัก: ค่อยๆ ลอกแผ่นปิดเมมเบรนออก ดูดและเติมน้ำยาล้างทิ้งน้ำยาล้างหลังจากพัก 30 วินาทีทำซ้ำขั้นตอนการซัก 5 ครั้ง
6. เพิ่มรีเอเจนต์ HRP-Conjugate 50 ไมโครลิตร ในแต่ละหลุม ยกเว้นหลุมควบคุมที่ว่างเปล่า
7. การฟักตัวตามที่อธิบายไว้ในขั้นตอนที่ 3
8. การซักตามที่อธิบายไว้ในขั้นตอนที่ 5
9. การระบายสี: เติม Chromogen Solution A 50 µl และ 50 µl Chromogen Solution B ลงในแต่ละหลุม ผสมด้วยการเขย่าเบาๆ และบ่มที่ 37℃ เป็นเวลา 15 นาทีโปรดหลีกเลี่ยงแสงในระหว่างการระบายสี
10. การสิ้นสุด: เพิ่มสารละลายหยุด 50 ไมโครลิตรในแต่ละหลุมเพื่อยุติปฏิกิริยาสีในบ่อควรเปลี่ยนจากสีน้ำเงินเป็นสีเหลือง
11. อ่านค่าการดูดกลืนแสง OD ที่ 450nm โดยใช้เครื่องอ่านแผ่นไมโครไทเตอร์ค่า OD ของช่องควบคุมว่างถูกตั้งค่าเป็นศูนย์ควรทำการทดสอบภายใน 15 นาทีหลังจากเติมสารละลายสต็อป
ความแม่นยำ
ความแม่นยำในการทดสอบภายใน (ความแม่นยำภายในการทดสอบ): ตัวอย่าง 3 ตัวอย่างที่มี E-Cad ระดับต่ำ กลาง และสูง ได้รับการทดสอบ 20 ครั้งในจานเดียวตามลำดับ
Inter-assay Precision (ความแม่นยำระหว่างการทดสอบ): ตัวอย่าง 3 ตัวอย่างที่มี E-Cad ระดับต่ำ กลาง และสูง ได้รับการทดสอบบนเพลตที่แตกต่างกัน 3 แบบ โดยทำซ้ำ 8 รายการในแต่ละเพลต
CV(%) = SD/ค่าเฉลี่ยX100
การทดสอบภายใน: CV<10%
ระหว่างการทดสอบ: CV<12%
ช่วงการทดสอบ
0.6pg/มล. -80pg/มล.
ความไว:
0.1 แผ่น/มล.
ผู้ติดต่อ: Mr. Steven
โทร: +8618600464506
