เซรั่ม 96 ชิ้น ชุดทดสอบ COVID-19 60 นาที Human HBeAb Elisa Kit

Human HBeAb Elisa Kit 96 การทดสอบ/Kit

HBeAb ELISA Kit
แค็ตตาล็อกหมายเลข: BE104A

การทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์สำหรับตรวจหาแอนติบอดีต่อ HBeAg ในซีรัมหรือพลาสมา

1. สรุปและหลักการของการทดสอบ

การมีแอนติบอดีต่อต้านไวรัสตับอักเสบบีไวรัส e แอนติเจนถูกใช้เป็นตัวบ่งชี้สำหรับ (1) แอนติเจนของ HBs ในระยะแรกก่อนที่จะมีการแพร่กระจายของไวรัสสูงสุด และ (2) การพักฟื้นในช่วงต้นเมื่อ HBeAg ลดลงต่ำกว่าระดับที่ตรวจพบได้นอกจากนี้ยังเป็นประโยชน์ในการยืนยันการแปลง seroconversionseroconversion จาก HBeAg positivity เป็น anti-HBe positivity บ่งชี้ว่าระดับการติดเชื้อไวรัสลดลงเนื่องจากการจำลองแบบของไวรัสลดลง

รีเอเจนต์

2 .วัสดุที่มาพร้อมกับชุด:
1.Microtiter เคลือบสารป้องกัน HBe บริสุทธิ์อย่างดี: 96 การทดสอบ
2. การควบคุมเชิงลบ: หนึ่งขวด 0.5 มล. anti-HBe Negative Control
3.Positive Control: หนึ่งขวด 0.5ml anti-HBe Positive Control
4.Enzyme Conjugate: 6 ml ที่มี HRP-conjugated-anti-HBe-HBeAg complex สำหรับการทดสอบ 96 ครั้ง
5.ล้างบัฟเฟอร์ Concentrate (20 x): 20 มล. สำหรับ 96 การทดสอบบัฟเฟอร์ควรเจือจาง 20 ครั้งด้วยน้ำกลั่นก่อนใช้งาน
6.Substrate Solution A: 6 ml HRP Substrate สำหรับการทดสอบ 96 ครั้ง
7.Substrate Solution B: 6 ml TMB Chromagen Substrate สำหรับการทดสอบ 96 ครั้ง
8.Stop Solution: กรดซัลฟิวริก 2N ขนาด 6 มล. 1 ขวด

3. ขั้นตอนการทดสอบ

1. ปล่อยให้รีเอเจนต์ทั้งหมดมีอุณหภูมิห้องก่อนใช้งาน
2. ตรวจสอบ Wash buffer เข้มข้นว่ามีผลึกเกลืออยู่หรือไม่หากเกิดผลึกในสารละลาย ให้ละลายโดยการให้ความร้อนที่ 37℃ จนกระทั่งผลึกละลายน้ำยาล้างบัฟเฟอร์เข้มข้น 1:19 เจือจางด้วย ddH2Oใช้ภาชนะที่สะอาดเท่านั้นในการเจือจางบัฟเฟอร์
3. สำหรับการทดสอบแต่ละครั้ง ให้ตั้งค่าการควบคุมเชิงบวกสองรายการและการควบคุมเชิงลบสองรายการจ่าย Positive Control 1 หยด (50 ul) และ Negative Control ลงในหลุมตามลำดับตั้งค่าหลุมดำหนึ่งหลุมเป็นตัวควบคุมพื้นหลัง และ 50ul ของตัวอย่างซีรัมหรือพลาสมาลงในหลุมตามลำดับ
4. เติม Enzyme Conjugate หนึ่งหยด (50 ul) ในแต่ละหลุมผสมเบา ๆ โดยหมุนแผ่นไมโครไทเทอร์บนแท่นแบนเป็นเวลา 1 นาทีอย่าเพิ่ม Enzyme Conjugate ลงในช่องว่างให้ดี
5. วางแผ่นไมโครไทเทอร์ลงในกล่องที่มีความชื้นและฟักที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 30 นาที
6. ล้างแต่ละหลุม 5 ครั้งโดยเติมแต่ละหลุมด้วยบัฟเฟอร์สำหรับล้างที่เจือจาง จากนั้นพลิกจานอย่างแรงเพื่อเอาน้ำออกทั้งหมด และปิดกั้นขอบของแต่ละหลุมบนกระดาษซับน้ำเป็นเวลาสองสามวินาที
7. เพิ่มหนึ่งหยด (50 ul) ของสารละลายพื้นผิว A ในแต่ละหลุม จากนั้นเพิ่มหนึ่งหยด (50 ul) ของสารละลายพื้นผิว B ในแต่ละหลุมผสมเบา ๆ และฟักที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 15 นาที
8. เติม Stop Solution หนึ่งหยด (50 ul) ลงในแต่ละหลุมเพื่อหยุดปฏิกิริยาของสีอ่าน OD ที่ 450 nm (450 nm/630 nm) ด้วยเครื่องอ่าน EIA